本方法采用分光光度法测定黄杨宁片中环维黄杨星D（C₂₆H₄₆N₂O)的含量。

本方法适用于中成药黄杨宁片。

供试品加0.05mol/L磷酸二氢钠缓冲液，置80℃水浴恒温1.5小时，定容。取一定量与溴麝香草酚蓝溶液反应后，用氯仿提取，氯仿置紫外可见分光光度计, 于波长410nm处测定吸收度，计算环维黄杨星D（C₂₆H₄₆N₂O)的含量。

1. 甲醇

2. 0.05mol/L磷酸二氢钠缓冲液

3. 溴麝香草酚蓝溶液：取溴麝香草酚蓝18mg, 置250mL量瓶中，加甲醇5mL使

溶解，加0.05mol/L磷酸二氢钠缓冲液至刻度，摇匀。

4. 氯仿

紫外-可见分光光度计

1. 对照品溶液的制备

精密称取在105℃干燥至恒重的环维黄杨星D对照品25mg，置250mL量瓶中，加甲醇70mL使溶解，用0.05mol/L磷酸二氢钠缓冲液稀释至刻度，摇匀，精密量取10mL置100mL量瓶中，用0.05mol/L磷酸二氢钠缓冲液稀释至刻度，摇匀，即得。（每1mL含环维黄杨星D 10μg)

2. 供试品溶液的制备

取供试品研细，精密称定（约相当环维黄杨星D 0.5 mg)，置50mL量瓶中，加0.05mol/L磷酸二氢钠缓冲液至近刻度，80℃水浴恒温1.5小时取出，冷却至室温，加0.05mol/L磷酸二氢钠缓冲液至刻度，摇匀，离心6分钟（每分钟转速3000转)，取上清液为供试品溶液。

1. 供试品的测定

取上述供试品溶液与对照品溶液各5mL，分别置分液漏斗中，各精密加入溴麝香草酚蓝溶液5 mL，摇匀，立即分别精密加入氯仿10 mL，振摇2分钟，静止1.5小时，分取氯仿层，置含0.5g无水硫酸纳的具塞试管中，摇匀，静置，取上清液，照分光光度法，分别在410nm波长处测定吸收度。计算。

注：分光光度法应以配制供试品的同批溶剂为对照，采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波长作为测定波长，一般供试品的吸收度读数，以在0.3-0.7之间的误差较小。仪器的狭缝波带宽度应小于供试品吸收带的半宽度，否则测得的吸收度偏低。狭缝宽度的选择，应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准。由于吸收池和溶剂本身可能有空白吸收，因此测定供试品的吸收度后应减去空白读数，再计算含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，一部，p.591。