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贯叶连翘及提取物-伪金丝桃素的含量测定-HPLC-UV
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方法名称:
  贯叶连翘及提取物-伪金丝素的含量测定-HPLC-UV
应用范围:
  用于贯叶连翘及提取物中伪金丝桃素的含量测定
方法原理:
 本品加甲醇超声提取,经液相色谱分离,在590 nm处测定峰面积,外标法计算含量
仪器设备及实验条件:
 

仪器    美国Agilent 1100 型高效液相色谱仪(含四元梯度泵、在线真空脱气机、自动进样器、柱温箱、二极管阵列检测器、ChemStation色谱工作站)

  色谱条件  色谱柱:依利特Kromasil C18色谱柱(4. 6 mm×200 mm,5 μm);流动相:甲醇-0. 006 mol/L磷酸氢二钠(87. 5:12. 5,v/v,用磷酸调pH至6. 5);流速:1. 0 mL/min;检测波长:590 nm;柱温:30 ℃

试样制备:
 

对照品溶液的制备   精密称取伪金丝桃素对照品1. 19 mg,置5 mL棕色量瓶中,加甲醇超声溶解并稀释至刻度,摇匀制得0. 238 mg/ mL对照品贮备液。从中精密量取200 μL加甲醇稀释至2 mL棕色量瓶,制成0. 0238 mg/ mL对照品溶液。

供试品溶液的制备   1)原药材供试品溶液的制备:取贯叶连翘药材粉碎,过80目筛,混匀,称取200 mg,精密称定,置50 mL量瓶中,加适量甲醇,超声处理1 h溶解,加甲醇稀释至刻度,摇匀,经0. 20 μm PTFE滤膜过滤,取续滤液,即得原药材供试品溶液。2)提取物供试品溶液的制备:称取贯叶连翘提取物12 mg,精密称定,置10 mL棕色量瓶中,加适量甲醇,超声处理1 h溶解,加甲醇稀释至刻度,经0. 20 μm PTFE滤膜过滤,取续滤液,即得提取物供试品溶液。

操作步骤:
  分别精密吸取伪金丝桃素对照液以及贯叶连翘及提取物供试品溶液适量,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算伪金丝桃素含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.med126.com)
备注:
 
参考文献:
  张俊松,王晓利,罗谦,等. HPLC测定贯叶连翘及提取物中伪金丝桃素和金丝桃苷的含量. 中成药.2006,28(5):709~712
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