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莲须—槲皮素—HPLC
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方法名称:
  莲须槲皮素—HPLC
应用范围:
  本方法适用于莲须中槲皮素含量的测定
方法原理:
 本品加甲醇回流提取,再用醋酸乙酯提取,经液相色谱分离,在370 nm处测定峰面积,外标法计算含量
仪器设备及实验条件:
 

仪器    LC-6A高效液相色谱仪(日本岛津):SPD26AV可见-紫外检测器,C-R3A色谱数据处理机;SIL-6A 自动进样器

色谱条件    色谱柱:Shim-pack CLC-ODS(6.0 mm×150 mm,5 μm);流动相:甲醇-0.025 mol/L磷酸(60∶40);流速:1.0 mL/min;柱温:25℃;检测波长:370 nm

试样制备:
 

对照品溶液制备    精密称定槲皮素对照品10.90 mg,置50 mL量瓶中,甲醇溶解并定容至刻度精密吸取5.0 mL置50 mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,使对照品溶液浓度为0.0218 mg/mL。

供试品溶液制备    取药材粗粉(过40目筛)1 g,精密称定,加甲醇50 mL回流2 h,立即过滤,滤渣加甲醇30 mL回流提取1 h,滤过,合并滤液,水浴蒸干,残渣加水10 mL溶解,转移至分液漏斗中,用醋酸乙酯提取5次(30,30,15,15,15 mL),合并提取液,蒸干,残渣加甲醇溶解,转至25 mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,备用。

操作步骤:
   分别精密吸取槲皮素对照液以及莲须供试品溶液适量,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算槲皮素含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.med126.com)
备注:
 
参考文献:
  孟宪生,沙明,曹爱民等.HPLC法测定莲须中槲皮素和山萘酚的含量.中成药. 2003. 25(12): 1004~1006
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