方法名称： |
金银花及叶—黄酮类物质的含量测定—HPLC |
应用范围： |
本方法适用于金银花及叶中黄酮类物质含量的测定 |
方法原理： |
本品粉碎后加甲醇超声提取，经液相色谱分离，在350 nm处测定峰面积，外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件： |
仪器 高效液相色谱仪Agilent 1100 （Agilent公司) 色谱条件 色谱柱：Zorbax 80A，Extend—C18（250 mm ×4. 6 mm，5 μm)；流动相：甲醇∶0.02%磷酸（50∶50)；流速：1. 0 mL/min；检测波长：350 nm ；柱温：30 ℃；进样量：10 μL |
试样制备： |
对照品溶液制备 准确称取槲皮素对照品0.0300 g，用甲醇溶解并定容于50 mL容量瓶，配制成0.60 mg/mL的溶液。取该溶液1.00 mL，用甲醇稀释并定容至10 mL，即得浓度为0.06 mg/mL的槲皮素对照品溶液，记为溶液A。以相同的方法制备浓度为0.057 mg/mL的木犀草素对照品溶液，记为溶液A。以相同的方法制备浓度为0.057 mg/mL的木犀草素对照品溶液，记为溶液B。取1 mL溶液A和1 mL溶液B，混合均匀成溶液C，即得。 供试品溶液制备 分别称取5 g经过干燥粉碎的金银花和金银花叶各一份，用100 mL甲醇在40 ℃超声提取30 min，过滤，减压浓缩，浓缩液用石油醚除杂，然后用甲醇定容至25 mL容量瓶，即得。 |
操作步骤： |
分别精密吸取槲皮素、木犀草素混合对照液以及金银花供试品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算黄酮类物质含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
王丽婷，杨敏丽. 高效液相色谱法同时测定金银花及叶中的黄酮类物质. 时珍国医国药. 2007，18（8)：1850～1851 |
