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金荞麦饮片—表儿茶素的含量测定—HPLC
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方法名称:
  金荞麦饮片—表儿茶素的含量测定—HPLC
应用范围:
  本方法适用于金荞麦饮片中表儿茶素含量的测定
方法原理:
 本品粉末分别加流动相和乙醇回流提取,经液相色谱分离,电化学检测法测定峰面积,外标法计算含量
仪器设备及实验条件:
 

仪器  WatersAlliance 高效液相色谱仪,Waters 2465安培检测器,Emp0wer色谱工作站(Waters公司,美国)

色谱条件  色谱柱:Diamonsil C18 (416 mm×250 mm,5 μm);流动相:甲醇—0.1 m0l/L磷酸盐缓冲液(15∶85,含0.02 m0l/L的氯化钠,pH 2.15)(原儿茶酸);甲醇—0.1 m0l/L 磷酸盐缓冲液(1:3,含0.02 m0l/L 的氯化钠,pH 2.15)(原儿茶醛);流速:1.0 mL/min;电极:参比电极为ISAAC(in—situ /AgCl),工作电极为玻碳电极,辅助电极为铂电极;检测电位:800 mV(原儿茶酸);600 mV(原儿茶醛);柱温:35 ℃;进样量:10 μL

试样制备:
 

对照品溶液制备    精密称取适量表儿茶素对照品,用甲醇配制成5.82 μg/mL的溶液,即得;精密称取适量原儿茶酸和原儿茶醛对照品,用流动相溶液溶解,制成原儿茶酸0.0768 mg/mL和原儿茶醛0.0214 mg/mL的对照品溶液。

供试品溶液制备    取金荞麦粉末约0.8 g,精密称定,置50 mL平底烧瓶中,精密量取25 mL流动相溶液,称重,回流提取1 h,放冷并补足重量。滤过,取续滤液过0.2 μm滤膜,即得含量测定用供试品溶液;取金荞麦粉末0.8 g,精密称定,置50 mL平底烧瓶中,精密加入50 %乙醇25 mL,称重,冷浸1 h,回流提取1 h,放冷并补足减失的重量。过0.2 μm滤膜,弃去初滤液,即得指纹图谱用供试品溶液。

操作步骤:
   分别精密吸取表儿茶素对照液以及金荞麦供试品溶液各10 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算表儿茶素含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.med126.com)
备注:
 
参考文献:
  杨滨、辛敏通、吕冬梅等.金荞麦饮片液相色谱含量测定及指纹图谱研究.中国中药杂志 .2006,31(2):117~119
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