（二)染色体G显带技术
1．原理 染色体的化学成份是核酸和蛋白质两部分。核酸以DNA为主，蛋白质有组蛋白和非组蛋白两种。因此染色体经蛋白水解酶类物质处理后，蛋白质已被水解而使DNA分子中碱基暴露，由于碱基中G/C和A/T组合的比例不同，对染料结合的程度不一，如这一段A/T碱基的成份多，则Giemsa染料易与它结合成深染；另一段G/C碱基的成份多，则Giemsa染料不易与其结合，结果成淡染，由于整条染色体上A/T和G/C的分布不匀，这样在染色体上呈现出深浅不一的条纹或者称带纹，该技术用Giemsa染色，故其带型称为G带。
2．操作过程
（1)按常规染色体技术制片。
（2)制好的染色体玻片，在80℃烘箱中，烘烤2h，置于室温。
（3)4℃冰箱PBS液5min。
（4)4℃冰箱PBS缓冲液含胰蛋白酶终浓度0.025%，消化10min。
（5)蒸馏水洗净胰酶。
（6)Giemsa染色20min。
（7)蒸馏水洗净染色液，晾干镜检。
4℃低温胰酶处理片子，其优点是：时间较长，易掌握。配制1次试剂可用1～2个月。
（三)高分辨染色体G带技术
1．原理常规的G带显带技术，在人类染色体中仅观察到320～450条带纹，对于一些染色体细微结构异常的识别是不够的。
氨甲碟呤抑制二氢叶酸还原酶，阻止叶酸转变为四氢叶酸，从而干扰了脱氧胸腺嘧啶核苷酸的合成，阻止了DNA的复制，使细胞被阻止在S期内。胸腺嘧啶核苷解除氨甲喋呤的作用，让被阻滞的细胞同时开始进行DNA复制，进而同步分裂；放线菌素D可增加染色体的长度，能显示更多的亚带。放线菌素D与核酸相互作用：①插入脱氧鸟嘌呤核苷酸和脱氧胞啶核苷酸之间，使DNA变长；②能与染色体缩短有关的特殊蛋白和DNA结合，因此，抑制了染色体正常的收缩过程。秋水仙胺抑制纺垂丝的形成，可以得到较多的晚前期、前中期、早中期的分裂相。这样染色体带纹可增加到500和850条，甚至可达1200～2000条之多。这一步对于研究较细小的染色体缺陷的基因定位，具有很大的意义。
2．材料和方法
（1)4ml培养液（为从日本进口的RPMi 1640或从美国进口的F10液)虽自制的小牛血清1ml。每ml加青、链霉素各100单位，pH=7.2。
（2)每瓶培养液内，另加自制的PHA或重庆产的PHA2.5mg。
（3)取外周血2ml，分别装入含培养液的4个培养瓶内。
（4)37℃孵育箱内培养72h。
（5)加入氨甲喋呤，最终浓度10-7mol/L，继续培养17h。
（6)用不含血清的培养液冲洗两次后，将上清液吸出，再加入含胸腺嘧啶核苷（最终浓度为10-5mol/L)的培养液，继续培养3h。
（7)再加入放线菌素D，最终浓度为3μg/ml，培养2h。
（8)加秋水仙胺，最终浓度为0.03μg/ml，培养2h。
（9)按常规染色体技术制片。
（10)按一般常用的G带显带技术，显示带纹。
3．注意事项
（1)高分辨染色体，重叠多，应增加固定次数和固定时间，可置于4℃冰箱存放24h后制片，用高距离滴片，以使染色体分散开。
（2)细胞培养液同步化后，如果用5-溴-2脱氧尿核苷（5-bromodeoxyuridine,BrdU)，则需加黑物包装进行暗培养。
