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细胞因子及其受体的生物活性检测法
来源:医学全在线 更新:2007/12/3 字体:

 

  (六)抗体形成法

  IL-6可在体外刺激某些B淋巴细胞系产生和分泌免疫球蛋白,常用的指示细胞有分泌IgG的ARH-77、CESS和分泌IgM的SKW6.CL-4。在一定的条件下,待检样品中IL-6水平与培养细胞上清IgG或IgM水平正相关,通过标准IL-6的对照可推算出待检样品中IL-6的活性。

表4-22 细胞因子生物学活性检测方法(举例)

被检细胞因子

实验系统

可干扰的因素
IL-1 D.10(小鼠T细胞) 增殖法(3H-TdR、MTT) 人IL-2;小鼠IL-2、IL-4、IL-7、GM-CSF、TNF等
  小鼠胸腺细胞 增殖法 TGF-β1、β2抑制作用
  IL-4(小鼠胸腺瘤) CTLL转换法(增殖法) 小鼠IL-4
  黑素瘤细胞A352 增殖抑制法  
IL-2 CTLL(小鼠杀伤性T细胞系) 增殖法 小鼠IL-4
IL-3 KG1(髓样白血病细胞) 增殖法  
  TF-1(前髓样细胞) 增殖法 EPO、IL-5、IL-6、GM-CSF
  小鼠造血细胞系FDCP-1 增殖法 GM-CSF
  人巨核母细胞白血病细胞系Mo7E 增殖法 GM-CSF、IL-9
  骨髓半固体造血祖细胞集落形成 20α类固醇脱氢酶 GM-CSF
    集落种类和数量 GM-CSF、IL-1、IL-6、G-CSF、M-CSF
IL-4 小鼠B细胞 诱导CD23、MHCⅡ类 IFN-γ有抑制作用
    抗原表达  
  PHA刺激的小鼠T细胞 增殖法 IL-2
  IL-4依赖细胞株 增殖法 IL-2
  人IL-4R转染CTLL 增殖法 IL-2
IL-5 抗Ig(或SAC)刺激B细胞诱导人或小鼠骨髓半固体培养中嗜酸性粒细胞成熟 增殖法 IL-3
  抗Ig处理的小鼠B细胞 IgM分泌  
  BCL-1(B淋巴瘤细胞) 增殖法 IL-4
IL-6 TF-1(前髓样细胞) 增殖法 EPO、IL-3、IL-5、GM-CSF
  B9(小鼠杂交瘤细胞) 增殖法 小鼠IL-4、IL-11
  7TD1(小鼠杂交瘤细胞) 增殖法 IL-11
  BM60 增殖法  
  HepG2(肝细胞) Fibronogen产生 LIF
  CESS(EBV转化人B细胞)   IgGβ1、TGF-β2有抑制作用
  DKW6.CL-4 IgM产生 TGFβ1、TGF-β2有抑制作用
IL-7 骨髓前B细胞 增殖法  
IL-8 中性粒细胞 软琼脂趋化法 其它化学趋化物质
    小室趋化法 G-CSF、M-CSF
IL-9 Mo7E(巨核细胞白血病系) 增殖法 IL-3、GM-CSF
IL-11 7TD1(小鼠杂交瘤细胞系) 增殖法 IL-6
  B9(小鼠杂交瘤细胞系) 增殖法 小鼠IL-4、IL-6
  T1165 增殖法 IL-6
IL-12 PBMC IFN-γ产生 IFNα/β/γ
  PHA活化T淋巴母细胞 增殖法 IL-2、IL-4
  PBL LAK杀伤(与IL-2协同) IL-2、IL-6
  骨髓祖细胞 GM集落形成 IL-3;TGF-β有抑制作用
  TF-1(前髓样细胞) 增殖法 EPO、IL-3、IL-5、IL-6
  小鼠造血细胞FDCP-1 增殖法 IL-3
  人巨核母细胞白血病细胞系Mo7E 增殖法 IL-3、IL-9
  AML-193 增殖法  
  造血祖细胞 粒细胞集落形成 IL-3、IL-9
  中性粒细胞 活化后超氧释放 GM-CSF
  WEHI164亚克隆13或L929 杀伤作用 GM-CSF、IL-6
      TNF-α和TNF-β(LT)有相似的杀伤作用
PDGF 成纤维细胞和SS、WHG、WI26、WI28 增殖法 FGF(1、2、5)、EGF、TGF-β、IL-1、TNF等
INF-α/β/γ 上皮细胞如Hep-2、Wish 抵抗病毒(如VSV)的致病变作用 FN-α/β/γ有相似的生物学活性
TGF-β 成纤维细胞(半固体培养) 增殖法  
  成骨细胞单层培养 增殖法  
  PHA刺激PBMC 增殖抑制法  
  ConA/IL-1诱导胸腺细胞 增殖抑制法 IL-2、IL-4
  人黑素瘤细胞A375 增殖抵制法 IL-1、IL-2、IL-4

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