（一)HLA-A、B、C抗原的检测
HLA-A、B、C抗原可用血清学方法鉴定，故又称SD抗原（serologically defined antigen),常采用微量淋巴细胞毒性试验（microlymphocytotoxicity test),又称补体依赖细胞毒试验（complement dependent cytotoxicity,CDC)。基本步骤是分离纯化外周血中的淋巴细胞，加一组已知HLA抗血清，20℃60分钏后，再加家兔补体，37℃ 60分钏后加台盼兰染色观察结果，如淋巴细胞染成兰色则为阳性，表明待检淋巴细胞表面具有与已知抗血清相应的抗原。也可用51Cr标记的细胞毒试验。
（二)HLA-DR、DQ抗原的检测
HLA-DR、DQ抗原检测的基本方法是采用微量淋巴细胞毒性试验。先从待检者外周血中分离纯B细胞，阳性血清可来自经产妇，但需用血小板吸收以除去抗HLA-A、B、C抗体。标准抗血清的主要有以下几种来源。
（1)经产妇血清：在多胎生产的妇女中，可得到抗HLA-A、B和C抗原的抗血清。因为胎儿的HLA抗原包含了父方抗原（因其中一个单倍体来自父方)，在分娩时，由于胎盘损伤等原因，胎儿的父方抗原免疫了母方，从而在母体内产生抗HLA抗血清，这种抗血清可能具有多种特异性，但多胎后，其中免疫原性最强的一种抗原可刺激诱导得到单一特异性抗血清。
（2)计划免疫志愿者的血清：给志愿者注射不相容的HLA淋巴细胞，受者产生特异性HLA同种抗体，可用于HLA-A、B、C、DR和DQ分型。
（3)单克隆抗体：至今报道的大都是经种间免疫（鼠抗人)获得，小鼠免疫系统识别人HLA抗原所产生的鼠抗人单抗不同于从经产妇获得的HLA抗血清，HLA抗原分子最易为鼠免疫系统识别的畅叙有种间送别的决定簇，
所以应用鼠杂交瘤技术获得HLA单抗大部分都是识别种间差异的共同决定簇，所谓单态性HLA单抗。已获得数百种HLA单抗中，仅少数为多态性HLA-A、B、C单抗。而在已获得的多态性单抗中也集中某几个少数的特异性抗原，要获得多数特异HLA单抗有赖于人-人杂交瘤技术的应用。第11次IHW报道用克隆的HLA等位基因转染小鼠L细胞，获取特异HLA抗原专一表达相应产物的转染细胞（transfactent)以筛选相应的HLA单克隆抗体。现已从70多个转染细胞中获得抗HLA多态部分的单抗约50多种，特别针对难以检出的DP以及部分DQ抗原的单抗，这些细胞和基因工程产生的制剂具有精细的分辨力，有助于确定各种HLA等位基因产物的结构和各人群特异性抗原的检测和分析。医学全.在线.网.站.提供
（三)HLA-D抗原的检测
以往HLA-D抗原用混合淋巴细胞培养（mixed lymphocyte culture)来鉴定，故又称LD抗原（lymphocyte defined antigen)，有双向MLC和单向MLC两种分型法。
1.双向MLC 供者和受者淋巴细胞在体外共同孵育时，由于Lads抗原不同而相互刺激转化为母细胞。供者和受者组织相容性愈差，相互刺激也愈强，转化率就愈高。双向MLC缺点是操作方法复杂，稳定性与重复性差，一般要5-7天，对尸体供肾者多无法预先测定。
2.单向MLC 属于阴性分型法，基本步聚是将已知HLA-D抗原的淋巴细胞用丝裂霉素C（mitomycin C)或X线照射处理，成为只有抗原激发能力而无增殖反应能力的“刺激细胞”。将刺激细胞与末经过这种处理的待测淋巴细胞进行混合培养，根据待测细胞出现母细胞反应的程度，则可知待测淋巴细胞上是否具有与“刺激细胞”上相同的HLA-D抗原。在MLC起激发抗原的主要是B细胞和单核细胞上的D抗原，反应细胞为CD4阳性T细胞。本法特点同双向MLC。在单向MLC中作为刺激细胞最好用纯合子配型细胞（homozygous typing cell,HTC),因为纯合子是两个单体型完全相同，因此只有一种D抗原。
纯合子分型细胞的来源：
（1)姨姑表婚配的子女约占1/16的机率找到纯合子细胞。
（2)多发性硬皮病患者中表现为HLA-D2和HLA-B7连锁不平衡的个体具有异常高的纯合子频率。
（3)风湿性关节炎患者D位点纯合的发生率也较高。
图6-12 姑姨表婚配的HLA单体型的遗传模式图
