微 信 题 库 搜 索
精品课程
热门课程
>
外科 妇产科 儿科
内科学 生理学 更多
药学专业
药理学 中药学 药物化学
生药学 卫生毒理学 更多
中医专业
中医基础理论 中医学 更多
口腔专业
口腔内科 口腔外科 更多
 医学全在线 > 精品课程 > 卫生毒理学 > 南华大学 > 正文
卫生毒理学电子教材-第八章 外来化合物的生殖发育毒性及其评价:第二节 生殖毒性及其评定
来源:南华大学资源网 更新:2013/9/10 字体:
<一、生殖毒性表现> 
<二、生殖毒性作用的评定>
※<一、生殖毒性表现>

外来化合物对生殖过程的损害作用可以表现为性淡漠、性www.med126.com/shiti/无能或各种形式的性功能减退。雌性可出现排卵规律改变、月经失调或闭经、卵巢萎缩、受孕减少、胚胎死亡、生殖力降低、不孕或不育等。雄性可表现为睾丸萎缩或坏死、精子数目减少等。

返回顶部

※<二、生殖毒性作用的评定>

外来化合物对生殖过程作用的评定主要通过生殖毒性试验来进行,过去也称为繁殖试验。生殖毒性试验可以全面反映外来化合物对性腺功能、发情周期、交配行为、受孕、妊娠过程、分娩、授乳以及幼仔断奶后生长发育可能发生的影响。评定的主要依据是交配后母体受孕情况(受孕率)、妊娠过程情况(正常妊娠率)、子代动物分娩出生情况(出生存活率)、授乳哺育情况(哺育成活率)以及断奶后发育情况等。此外还可同时观察出生幼仔是否有畸形出现,但畸形观察主要在发育毒性评定中进行。

   (一)试验方法原则

生殖毒性试验多用性成熟大鼠,也可用小鼠或家。大鼠自然受孕率较小鼠为高,较为理想。

一般设三个剂量组,另设对照组。最高剂量组剂量应该超过预期人类实际接触水平,希望能使亲代动物出现轻度中毒,但不出现死亡或死亡率不超过10%,也不能完全丧失生育能力。低剂量组的亲代动物不应观察到任何中毒症状。另设中间剂量组应仅能出现极为轻微的中毒症状。中间剂量与高剂量和低剂量应呈等比级数。

最高剂量组轻度中毒的概念是进食量显著减少,体重明显下降。要求最高剂量组出现轻度中毒的目的是表明在已能引起中毒剂量下,如仍不致影响正常生殖过程,则表示该受试物确实不具有生殖毒性作用。反之,如剂量过低,则难于确定受试物是否确实不具有生殖毒性,有可能因剂量不足,未达到最小有作用剂量。

剂量的确定可用少数动物进行预试,如已进行过亚慢性和急性毒性试验,则最高剂量也可略高于亚慢性毒性试验中最大无作用剂量,或相当于LD50的1/10左右。最低剂量可相当于最高剂量的1/30。如经多次试验确实证实1 000mg/kg体重剂量对生育力无损害作用,或最高剂量可引起亲代动物表现一般毒性作用,但对生育力无不利影响,则可不进行其它剂量试验。

动物接触受试物的方式应参照人类实际接触途径。一般可混入饲料或饮水中,由动物摄取;也可采国家医学考试网用灌胃或胶囊法。试验期间每周应根据动物体重并参照进食量(大鼠可按每日15~20g,小鼠每日5~10g计算)和要求的摄入剂量(mg/kg体重/日)调整饲料中应混入受试物的数量。应始终保持达到动物应摄入的剂量。

利用大鼠或小鼠进行试验时,每组雌雄各16~20只,或雌性16~20只,雄性8~10只。

 

   (二)试验方法

现以大鼠为例,介绍三代两窝生殖试验法和两代一窝生殖试验法:

1. 三代两窝生殖试验

大鼠断奶或出生8周后,开始喂受试物或以其它方式与受试物接触,共进行8~12周,即直到性发育成熟,相当出生后4个月左右。每周至少称体重一次,记录进食量并观察有无中毒症状或死亡。将雌雄亲代动物(F0)同笼交配,雌雄比例为1:1或2:1,直到受孕或进行3周为止。雌鼠受孕后即单笼饲养,继续接触受试物。交配3周后,如仍未受孕,则停止交配,并进行生殖器官病理学检查。

确定是否受孕的方法是每日清晨进行雌性动物阴道涂片,检查有无精子;亦可检查阴道有无阴栓出现,以确定受精日期。小鼠阴栓可在阴道口存留较长时间,但在大鼠极易脱落,次晨检查时往往在笼下粪便盘中检出。发现阴栓或检出精子,即为受孕0日,也有作为受孕第1日。

亲代动物(F0)所生仔鼠为第一代(F1)。出生后应检查每窝幼仔数、死亡数以及肉眼可见幼仔畸形。出生后第4天和第21天逐个称取重量,仔鼠断奶后,母鼠休息10天,再与雄鼠交配一次,并生出第二窝仔鼠,亲代共生出仔鼠两窝,分别为F1a 和F1b。F1b出生后,将雄性亲鼠淘汰,雌性亲鼠继续喂受试物,直至F1b出生后21天断奶为止。F1a断奶后观察其发育情况,不再喂受试物。F1b断奶后,继续接触受试物8 ~12周,直到性发育成熟,选出雌雄各16~20只,按前法进行交配。F1b所产第一窝幼仔为F2a,F2a 断奶后,其母鼠F1b休息10天,再次交配,所生幼仔为F2b,F2b 断奶后,将F1b 淘汰。F2b 交配处理方法与F1b 相同。但F2b 也可只交配一次,所产仔鼠为F3a,不再进行第二次交配,试验结束。

2.两代一窝和一代一窝生殖试验

近年来许多国家与机构多规定采用两代一窝或一代一窝试验法,我国国家环境保护局《化学品测试准则(1990年)》即采用两代生殖试验或一代生殖试验。两代一窝生殖试验法基本程序与三代两窝试验法相同,但只进行到第二代F2,每代只交配一窝。

(三)观察指标

在上述各种生殖毒性试验中,根据哺乳动物全部生育繁殖过程,可观察下列4个指标:

1.受孕率    反映雌性动物生育能力以及雌性动物受孕情况。

妊娠雌性动物数

   受孕率=  ————————  ×  100%

   交配雌性动物数 

2.正常分娩率 反映雌性动物妊娠过程是否受到影响。

  正常分娩雌性动物数

   正常分娩率= ————————————×  100%

   妊娠动物数 

  3.幼仔出生存活率   反映雌性动物分娩过程是否正常,如分娩过程受到影响,则幼仔往往在出生4天内死亡。

  出生后4天存活幼仔数

   幼仔出生存活率= ———————————×  100%

  分娩时出生幼仔数 

  4.幼仔哺乳成活率 反映雌性动物授乳哺育幼仔的能力。

   21天断奶幼仔存活数

   幼仔哺乳成活率= ———————————×  100%

   出生后4天幼仔存活数 

返回顶部

相关文章
 生物化学与分子生物学参考文献
 护理学基础教案:第十六章
 内科学图片库:间质性肺炎图片50
 医学微生物学教学图片资源:Dane颗粒
 口腔额面外科考核办法
 生理学教学大纲:第五章 呼吸
   触屏版       电脑版       全站搜索       网站导航   
版权所有:医学全在线(m.med126.com)
网站首页
频道导航
医学论坛
返回顶部