课程名称

临床免疫学检验

授课题目（章节或主题)

单克隆抗体与基因工程抗体

授课教师

徐霞

所属二级学院

第一临床学院

所属教研室

临床免疫学检验

职称

主任技师、副教授

授课时间

2006 年 9月11 日第 2周星期 2 第4-5 节第   次课

授课时数

2   学时

授课班级

医学检验 专业（本科√□ 专科□)  2003 级I、II、III 班

教学课型

理论课√□ 实验课□ 习题课□ 讨论课□ 实习（践)课□  其它□

教材名称、作者、出版社及出版时间

临床免疫学检验 吕世静 中国医药科技出版社2004年8月

教学目标与要求：

1．掌握单克隆抗体的概念、与多克隆抗体的异同点

2．掌握杂交瘤技术的基本原理、单克隆抗体的制备流程及单克隆抗体的临床应用

3．熟悉细胞DNA合成的途径、HAT培养基的选择原理

4．熟悉细胞融合、阳性克隆的筛选及克隆化的方法

5．熟悉腹水单克隆抗体的制备及纯化

6．了解基因工程抗体的概念及特点

主要知识点、重点与难点：

知识点：复习抗体的概念、结构、种类，在多克隆抗体知识的基础上讲解单克隆抗体的概念

重点：单克隆抗体的概念、特点，杂交瘤技术的基本原理，单克隆抗体的制备流程及临床应用

难点：HAT培养基的选择原理

教学方法（请打√选择)：

讲授法√□　 讨论法□ 　演示法□　 自学辅导法□　 　练习法(习题或操作) 　读书指导法□

ＰＢＬ（以问题为中心的教学法)√□　　案例法□　 其他□

教学媒体（请打√选择)：

教材□ 板书√□ 实物□  标本□  挂图□ 模型□ 投影□ 幻灯□   录像□   CAI（计算机辅助教学)√□

教学过程设计（包括讲授内容、讲授方法、时间分配www.med126.com、媒体选用、板书设计等)：

讲授内容：

杂交瘤技术的基本原理：杂交瘤细胞的特点、细胞融合技术、常用的骨髓瘤细胞株（NS1、SP2/0)、细胞融合剂、细胞DNA合成途径、选择培养基的成分及作用 30分钟

单克隆抗体的制备流程：亲本细胞的选择和制备、细胞融合、杂交瘤细胞的筛选和克隆化、单抗的制备和纯化 30分钟

基因工程抗体的概念及现状  10分钟

小结：单克隆抗体的特性及临床应用价值  10分钟

讲授方法：

在复习抗体的概念、结构、种类及多克隆抗体知识的基础上讲解单克隆抗体的概念。重点内容由老师讲解，相关基础免疫知识以提问的方式引导学生回答，再由教师补充。

采用多媒体课件、配合板书

提问、课堂讨论等师生互动的设计：

1．  免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合后会出现几种组合形式的细胞？最终能在HAT培养基中存活下来的是何细胞？为什么？

2．  融合后阳性克隆的筛选（分泌专一抗体)方法？提示用间接ELISA法，请同学自行设计。

教学小结、复习思考及作业题布置：

小结：传统方法制备的免疫血清为多克隆抗体，其特异性不高、交叉反应多、来源有限。单克隆抗体是只识别单一抗原表位的B淋巴细胞克隆产生的同源抗体。其理化性质高度均一、效价高、只与一种抗原表位发生反应、生物活性单一、具有高度特异性又易于大量生产，因此其作为一种有效的生物制品被广泛应用于生命科学的各个领域，尤其在疾病的诊断治疗方面显示出极大的应用价值。单克隆抗体是应用B细胞杂交瘤技术进行制备的。是在细胞融合的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。这种杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性，即既能够分泌抗体又能在体外长期繁殖，经过克隆化后成为单个细胞克隆，分泌的抗体即为单克隆抗体。基因工程抗体是指应用DNA重组及蛋白工程技术对编码抗体的基因按不同的需要进行改造和装配，经导入适当的受体细胞后重新表达的抗体，包括人源化抗体、小分子抗体、双特异性抗体和抗体融合蛋白等。

教学中的创新点（加强基础与临床联系、外语运用、启发学生思维、指导学生自学、介绍学科新进展等方面)：

1．加强基础与临床的联系：

在介绍单抗制备流程时，以临床上急性心梗的特异性标志物—肌钙蛋白I的检测为例，要求学生跟着老师“如何制备抗肌钙蛋白I单克隆抗体” 的问题同步思维，以此主线串出单抗制备流程。

2．加强相关学科的联系

   在介绍HAT选择培养基时，从细胞的DNA合成途径（生化知识)来讲解HAT选择培养基的三种关键成分及其为什么能起到选择作用？

3．小结时以动画的形式生动的再现单克隆抗体和多克隆抗体的制备流程及其设计的关键知识点。

参考资料（包括辅助教材、参考书、文献等)：

医学免疫学  龚非力主编（科学出版社2003年1月)

临床免疫学和免疫检验  王兰兰主编（人民卫生出版社2003年2月)

Roitt IM,Delves PJ,Roitt’s Essential Immunology Tenth Edition Blackwell Publishing Oxford.2001

教研室

意 见

教研室主任签章： 年　　月　　日

教学后记（即教学实施情况总结分析，在课程结束后填写)

整堂课以“为什么要使用单抗”为主要问题，从•一个抗原分子可能含有许多抗原决定基•一个B细胞只会生产一种抗体•传统抗血清对相似抗原会有交叉反应性•B细胞无法在培养基中生长•肿瘤细胞可在培养基中永久生长

•利用细胞融合法可结合两种特性等要点层层展开，配合板书和简要的提纲、图片、动画，使学生始终能跟随老师同步思维，感觉不错。学生也表示，老师的问题一个跟一个，很吸引同学们的注意力，想开小差都开不了。