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病理生理学-实验教学环节实验指导:缺氧
来源:河北医科大学 更新:2013/10/14 字体:

实验性质:验证性实验

实验学时:4学时

实验分组人数:4-5人

一、不同类型缺氧对机体的影响

(一)实验目的

复制动物缺氧性、血液性缺氧模型,观察缺氧时动物的一般情况、呼吸、口唇黏膜、肝脏及血液颜色的变化,以了解不同类型缺氧对机体的影响及其表现特点。

(二)实验材料

1. 实验动物  小鼠

2. 实验仪器  天平、CO发生装置。

3. 实验用药  钠石灰、甲酸、浓硫酸、5%亚硝酸钠、1%美兰、生理盐水。

4. 器械  小鼠缺氧瓶(125ml带塞磨口瓶)、5ml量筒、lml注射器、酒精灯、剪刀、镊子。

(三)实验步骤与观察

1. 低张性缺氧(乏氧性缺氧)

(1) 取钠石灰少许(约5g)及小鼠一只放入缺氧瓶内,观察动物的一般情况、呼吸(频率和深度)、口唇黏膜的颜色,然后塞紧瓶塞,记录时间,观察动物缺氧后的表现与正常有何不同,直到动物死亡为止。

(2) 保留动物尸体,待2实验做完后,再依次打开其腹腔,比较肝脏及血液颜色。

2. 血液性缺氧

(1) 一氧化碳中毒:装好CO发生装置。将一只小鼠放入抽滤瓶中,观察其正常表现,然后与CO发生装置连接。取甲酸3ml放入试管内,然后沿试管壁缓慢加入浓硫酸2ml,塞紧瓶塞。观察指标与方法同上。

(2) 亚硝酸钠中毒:取体重相近的两只小鼠,观察正常表现后,向腹腔注入5%亚硝酸钠0.3ml,其中一只注入亚硝酸钠后,立即再向腹腔内注入1%美兰溶液0.3ml,另一只再注入生理盐水0.3ml。比较两鼠表现及存活时间有无差异,其余指标同上。

(四)注意事项

1. 缺氧瓶一定要密闭。

2. 小鼠腹腔注射,应稍靠左下腹,勿损伤肝脏,也应避免将药液注入肠腔及膀胱内。

3. 若CO产生不足,可用酒精灯加热,加速CO的产生,但不可过热至液体沸腾,以防试管爆炸或CO产生过多过快,动物迅速死亡,观察指标改变不明显。

二、影响缺氧耐受性的因素

(一)实验目的

观察神经系统机能状态的改变及外界环境温度变化对缺氧耐受性的影响(以低张性缺氧为例),了解条件因素在缺氧发病中的重要性,以及临床应用冬眠和低温治疗的实用意义。

(二)实验材料

1. 实验动物  小鼠

2. 实验药品  1%咖啡因、0.25%氯丙嗪、生理盐水、钠石灰、碎冰块、热水。

3. 实验器材  小鼠缺氧瓶、500m1烧杯、温度计、粗天平、注射器。

(三)实验步骤与观察

1.环境温度变化对缺氧耐受性的影响

(l) 取小鼠缺氧瓶三个,各放入同等量钠石灰少许。

(2) 取500m1烧杯二个,都先加入适量自来水,然后一个加碎冰块将其水温调到0-4℃,另一个加入热水,其温度调到40-42℃。

(3) 取体重相近的小鼠三只,称重后,分别装入缺氧瓶内,将缺氧瓶分别放入冰水、热水和室温中,瓶塞盖紧后开始计时。持续观察各鼠在瓶中www.med126.com/jianyan/的活动情况,并计录存活时间。

(4) 比较三只小鼠表现及存活时间有无差异。

2. 神经系统机能状态不同对缺氧耐受性的影响

(1) 取体重相近的小鼠三只

甲鼠:腹腔注射1%咖啡因0.1m1/10g体质量。

乙鼠:腹腔注射0.25%氯丙嗪0.1m1/10g体质量。

丙鼠:腹医.学全在线www.med126.com腔注射生理盐水0.1m1/10g体质量。

(2) 仔细观察待咖啡因、氯丙嗪药效发挥后,将三只小鼠分别放入有钠石灰的缺氧瓶内,盖紧瓶塞,开始计录存活时间。观察三只小鼠的表现并比较存活时间有何差异。

三、种属、 年龄对大气性缺氧耐受性的影响(示教)

(一)实验目的

观察蟾蜍、初生小鼠和成年小鼠在大气性缺氧下的表现和存活时间的不同,以观察种属和年龄对缺氧耐受性的影响。

(二)实验材料

1. 实验动物  蟾蜍、初生小鼠、成年小鼠。

2. 实验仪器  真空汞、小动物减压装置(用玻璃真空干燥器改装)。

3. 实验步骤与观察

(1) 将蟾蜍、初生小鼠和成年小鼠一同放入真空干燥器内。

(2) 用真空泵抽气(减压速度为每分钟上升2000m模拟高度直到9000m模拟高度,减压600mmHg)并开始计时,观察动物表现,分别记录其存活时间。

思考题

1. 低张性缺氧呼吸变化的机制?

2. 各种类型缺氧血液、内脏颜色改变的机制?

3. 影响缺氧耐受性的因素有哪些?

 (李淑琴)

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