本方法采用高效液相色谱法测定双羟萘酸噻嘧啶原料药中双羟萘酸噻嘧啶的含量。

本方法适用于双羟萘酸噻嘧啶原料药。

供试品经流动相溶解并定量稀释，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长288nm处检测双羟萘酸噻嘧啶的峰面积，计算出其含量。

1. 乙腈

2. 醋酸

3. 二乙胺

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

硅胶为填充剂，理论塔板数按噻嘧啶峰计一般不低于8000，噻嘧啶峰与双羟萘酸峰的分离度应大于10。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：乙腈 水 醋酸 二乙胺=94 2.5 2.5 1

2.2 检测波长：288nm

2.3 柱温：室温

1. 对照品溶液的制备

精密称取双羟萘酸噻嘧啶对照品适量，用流动相溶解并定量稀释制成每1mL约含80µg的溶液，即为对照品溶液。

2. 供试品溶液的制备

精密称取供试品适量，用流动相溶解并定量稀释制成每1mL中约含80µg的溶液，即为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长288nm处测定双羟萘酸噻嘧啶（C₁₁H₁₄N₂S·C₂₃H₁₆O₆)的峰面积，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p.59。