本方法采用分光光度法测定托吡卡胺滴眼液中托吡卡胺的含量。

本方法适用于托吡卡胺滴眼液。

供试品稀释后，分别加0.1mol/L硫酸溶液与硼砂标准缓冲液制成供试液，置紫外可见分光光度计，酸溶液于波长254nm处测定吸收度（A₂₅₄)，缓冲溶液在296nm的波长处测定吸光度（A₂₉₆)，计算托吡卡胺在254nm的波长处的吸光度（A₂₅₄-0.764A₂₉₆)，计算出其含量。

1. 硫酸溶液（0.1mol/L)

2. 硼砂标准缓冲液

紫外可见分光光度计

1. 硫酸溶液（0.1mol/L)

取盐酸6mL，加水适量使成1000mL，摇匀。

2. 硼砂标准缓冲液

精密称取硼砂3.81g（注意避免风化)，加水使溶解并稀释至1000mL，置聚乙烯塑料瓶中，密塞，避免空气中二氧化碳进入。

3.供试品溶液的制备

精密量取供试品适量（约相当于托吡卡胺25mg)，置100mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取10mL二份，各置100mL量瓶中，分别加0.1mol/L硫酸溶液与硼砂标准缓冲液并稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

照紫外分光光度法，酸溶液于波长254nm处测定吸收度（A₂₅₄)，缓冲溶液在296nm的波长处测定吸光度（A₂₉₆)，计算托吡卡胺在254nm的波长处的吸光度（A₂₅₄-0.764A₂₉₆)，按C₁₇H₂₀N₂O₂的吸收系数（E^1%_1cm)为172计算，即得。

注：分光光度法应以配制供试品的同批溶剂为对照，采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波长作为测定波长，一般供试品的吸收度读数，以在0.3-0.7之间的误差较小。仪器的狭缝波带宽度应小于供试品吸收带的半宽度，否则测得的吸收度偏低。狭缝宽度的选择，应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准。由于吸收池和溶剂本身可能有空白吸收，因此测定供试品的吸收度后应减去空白读数，再计算含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，二部，p.197。