方法名称: |
胞磷胆碱钠的测定—高效液相色谱法 |
应用范围: |
本方法采用高效液相色谱法测定胞磷胆碱钠(C14H25N4NaO11P2·H2O)的含量。 本方法适用于胞磷胆碱钠。 |
方法原理: |
供试品制成水溶液,进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长276nm处检测胞磷胆碱钠吸收值,计算出其含量。 |
试剂: |
1. 甲醇 2. 磷酸盐缓冲液 3. 磷酸四丁基铵溶液 |
仪器设备: |
1. 仪器 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂, 2. 色谱条件 |
试样制备: |
1. 磷酸盐缓冲液 0.1mol/L磷酸二氢钾溶液和磷酸四丁基铵溶液等量混合。 2. 磷酸四丁基铵溶液 取0.01mol/L四丁基氢氧化铵溶液用磷酸调pH值至4.5。 3. 称取供试品 精密称取本品适量。 4. 对照品溶液的制备 精密称取5’-胞苷酸适量,加水制成每1mL含0.25mg的溶液,取上述溶液适量,与胞磷胆碱钠对照品等量混合,摇匀,即得。 5. 供试品溶液的制备 将供试品加水溶解后,制成每1mL含0.25mg的溶液,摇匀,即得。 注:“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。 |
操作步骤: |
分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各10μL 注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器,于波长276nm处测定胞磷胆碱钠的吸收值,计算出其含量。 |
参考文献: |
中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005年版,二部,p.443。 |