本方法采用高效液相色谱法测定脑得生片中葛根素的含量。

本方法适用于脑得生片中葛根素的含量测定。

供试品用乙醇回流提取后，过滤，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用荧光检测器检测，记录葛根素的吸收值，计算出其含量。

1.甲醇

2. 乙醇

3.二次重蒸水

1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。

1.3 荧光检测器

2 色谱条件

2.1 流动相：甲醇＋水（25：75)，流速：1ml/min。

2.2 检测波长：固定激发波长350士20nm，固定检测波长400nm-800nm

2.3 温度：35℃。

1. 对照品溶液的制备

取105℃干燥至恒重的葛根素对照品精密称定，约10 mg置25m1棕色量瓶中。加乙醇溶解并稀释至刻度.摇匀，精密量取1mL，置于10mL量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

2. 供试品溶液的制备

取脑得生20片，精密称定，求得平均片重。研细，精密称取脑得生细粉适量(约相当葛根素0.2g)，置150m1三角烧瓶中，精密加入乙醇100m1，精密称定。水浴加热回流提取1h，放冷至室温。精密称量，并准确补加损失的乙醇，摇匀。用孔径0.45μm滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各10μL 注入高效液相色谱仪，用荧光检测器测定葛根素的吸收值，计算出其含量。

人民军医药学专刊，反相高效液相色谱法测定脑得生片中葛根素含量，1997，13(1)，p46。