本方法采用分光光度法测定人工牛黄中胆红素的含量。

本方法适用于由牛胆粉、胆酸、猪去氧胆酸、牛黄酸、胆红素、胆固醇、微量元素等制成的人工牛黄。

供试品经三氯甲烷超声定量提取，过滤，续滤液置紫外可见分光光度计, 于波长453nm处测定吸收度，计算其胆红素的量。

三氯甲烷

紫外-可见分光光度计

对照品溶液的制备

取胆红素对照品10mg，精密称定，置100mL棕色量瓶中，加三氯甲烷80mL超声处理使充分溶解，加三氯甲烷稀释至刻度，摇匀。精密量取10 mL，置50 mL棕色量瓶中，用三氯甲烷稀释至刻度，摇匀，制成每1mL含胆红素20mg的溶液。

1. 标准曲线的绘制

精密吸取对照品溶液4mL、5mL、6mL、7mL与8mL，分别置25 mL棕色量瓶中，用三氯甲烷稀释至刻度，摇匀，照分光光度法，分别在453nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

2. 供试品的测定

取本品80mg，精密称定，置100 mL棕色量瓶中，加三氯甲烷80mL超声处理使充分溶解，用三氯甲烷稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液在453nm波长处测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液中胆红素的重量，计算。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，一部，p.4。