本方法采用分光光度法测定人工牛黄中胆酸的含量。

本方法适用于由牛胆粉、胆酸、猪去氧胆酸、牛黄酸、胆红素、胆固醇、微量元素等制成的人工牛黄。

1. 60%冰醋酸溶液

2. 糠醛溶液（1→100)

3. 硫酸溶液（取硫酸50mL与水65mL混合)

可见分光光度计

对照品溶液的制备

取胆酸对照品12.5mg，精密称定，置25mL量瓶中，加60%冰醋酸溶液使溶解，并稀释至刻度，摇匀，制成每1mL含胆酸0.5mg的溶液。

1. 标准曲线的绘制

精密量取对照品溶液0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL与1mL，分别置具塞试管中，各试管加入60%冰醋酸溶液稀释成1.0 mL，再分别加新制的糠醛溶液（1→100)1.0 mL，摇匀，在冰浴中放置5分钟，精密加入硫酸溶液（取硫酸50mL与水65mL混合)13 mL，混匀，在70℃ 水浴中加热10分钟，迅速移至冰浴中，放置2分钟，以相应的试剂为空白，照分光光度法，在605nm波长处测定吸光度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

2. 供试品的测定

取本品0.1g，精密称定，置50 mL量瓶中，加60%冰醋酸溶液适量，超声处理5分钟，用60%冰醋酸溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液各1mL，分别置甲、乙两个具塞试管中，于甲管中加新制的糠醛溶液1mL，乙管中加水1mL作空白，分别摇匀，在冰浴中放置5分钟，精密加入硫酸溶液（取硫酸50mL与水65mL混合)13 mL，混匀，在70℃ 水浴中加热10分钟，迅速移至冰浴中，放置2分钟，以相应的试剂为空白，照分光光度法，在605nm波长处测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含胆酸的重量，计算。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，一部，p.4。