本方法采用高效液相色谱法测定木通中齐墩果酸、常春藤皂苷元的含量。

本方法适用于木通科植物木通Akebia quinata(Thunb.) Decne.、三叶木通Akebia trifoliata (Thunb.) Koidz.或白木通Akebia trifoliata (Thunb.) Koidz.var.australis (Diels) Rehd.的干燥藤茎。

本品粉末加甲醇超声提取，滤液蒸干，残渣水溶后，加水饱和正丁醇提取，提取液蒸干，残渣加甲醇、盐酸、加热水解，水解物用三氯甲烷提取，蒸干，残渣加甲醇溶解、定容，摇匀，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长210nm处检测齐墩果酸和常春藤皂苷元的吸收值，计算出其含量。

1. 甲醇

2 .正丁醇

3 .盐酸

4 .三氯甲烷

5 .冰醋酸

6 .三乙胺

1 仪器

1.1高效液相色谱仪

1.2色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按齐墩果酸峰计算应不低于2000。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：甲醇 水 冰醋酸 三乙胺＝87 13 0.04 0.02

2.2检测波长：210nm

2.3柱温：室温

1. 称取供试品

精密称取本品粉末（过四号筛)2g, 为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取其墩果酸对照品、常春藤皂苷元对照品适量，加甲醇制成每1mL各含1mg的混合溶液。

3. 供试品溶液的制备

取本品粉末（过四号筛)约2g，精密称定，加甲醇50mL，超声处理（功率250W，频率50kHz)30分钟，滤过，残渣用甲醇适量洗涤，合并滤液与洗液，回收溶剂至干，残渣加水10 mL溶解，用水饱和正丁醇振摇提取3次，每次20 mL，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇20 mL、盐酸2 mL， 加热水解4小时，水解物加水10 mL，用三氯甲烷振摇提取2次，每次20 mL，合并提取液，回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解并转移至10 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长210nm处测定齐墩果酸（C₃₀H₄₈O₃)和常春藤皂苷元（C₃₀H₄₈O₄)的峰面积，计算出其含量。