方法名称: |
消糜栓-人参皂苷Re的测定-高效液相色谱法 |
应用范围: |
本方法采用高效液相色谱法测定消糜栓中人参皂苷Re的含量。 |
方法原理: |
本品加正丁醇加热回流,放冷,滤液取适量蒸干,残渣加甲醇溶解,摇匀,滤过,续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长203nm处检测人参皂苷Re的吸收值,计算出其含量。 |
试剂: |
1. 甲醇 2 .乙腈 3 .0.05%磷酸溶液 4. 正丁醇 5 .乙醚 6. 氨试液 |
仪器设备: |
1 仪器 1.1 高效液相色谱仪 1.2 色谱柱 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按人参皂苷Re计算应不低于2500。 1.3 紫外吸收检测器 2色谱条件 2.1流动相:乙腈 0.05%磷酸溶液=20 80 2.2检测波长:203nm 2.3柱温:室温 |
试样制备: |
1. 称取供试品 取重量差异项下的本品,剪碎,取约6g,精密称定,为供试品。 2. 对照品溶液的制备 精密称取人参皂苷Re对照品适量,加甲醇制成每1mL含0.25mg的溶液。 3. 供试品溶液的制备 取重量差异项下的本品,剪碎,取约6g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入水饱和正丁醇100mL,称定重量,加热回流1小时,放冷,再称定重量,用水饱和的正丁醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液50 mL,置分液漏斗中,用正丁醇饱和的氨试液洗涤2次,每次50 mL,再用正丁醇饱和的水50 mL洗涤,分取正丁醇液,蒸干,残渣加甲醇适量使溶解,转移至10 mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,置0℃以下放置15分钟,取出,立即滤过,取续滤液,作为供试品溶液。 |
操作步骤: |
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20mL,注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器于波长203nm处测定人参皂苷Re(C48H82O18)的峰面积,计算出其含量。 |
参考文献: |
中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005版,一部,p583。 |