本方法采用高效液相色谱法测定益心酮片中金丝桃苷的含量。

本方法适用于中成药益心酮片。

1. 乙腈

2 .0.5%醋酸溶液

3 .四氢呋喃

4 .甲醇

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按金丝桃苷峰计算应不低于3000。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：甲醇 乙腈 四氢呋喃 0.5%醋酸溶液＝1 1 19.4 78.6

2.2检测波长：363nm

2.3柱温：室温

1. 称取供试品

取本品20片，除去包衣，精密称定，研细，取约0.5g，精密称定，为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取金丝桃苷对照品适量，加稀乙醇制成每1mL含25mg的溶液。

3. 供试品溶液的制备

供试品，置50 mL量瓶中，加稀乙醇40mL，超声处理（功率300W，频率50kHz)30分钟，放冷，用稀乙醇稀释至刻度，摇匀，离心（每分钟12000转)10分钟或用微孔滤膜（0.45mm)滤过，取上清液或续滤液作为供试品溶液。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长363nm处测定金丝桃苷（C₂₁H₂₀O₁₂)的峰面积，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p575。