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红芪-毛蕊异黄酮和芒柄花素的含量测定-HPLC
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方法名称:
  红芪-毛蕊异黄酮和芒柄花素的含量测定-HPLC
应用范围:
  红芪的质量控制提供了依据
方法原理:
 本品细粉加甲醇等超声提取,经液相色谱分离,在254nm处测定峰面积,外标法计算含量
仪器设备及实验条件:
 

仪器设备 2695 型高效液相色谱仪(美国Waters公司)2996 二极管阵列检测器;M32色谱管理站;

色谱条件  胜大连依利特C18柱(4.6mm×250mm,5μm,i.d.).水-乙腈为梯度流动相;温度25 ℃;色谱图光谱采集范围:190~400nm;以黄酮为参照物检测波长254nm。
试样制备:
 

对照品溶液的制备  分别精密称取毛蕊异黄酮、芒柄花素对照品,用甲醇溶解定容,制成浓度为毛蕊异黄酮2.350g/L,芒柄花素2.325g/L的对照品溶液

供试品溶液的制备  (正丁醇法) 用四分法称取药材2.500 g ,用甲醇超声提取3(303030mL) ,每次30 min蒸干甲醇。残渣用40 mL 水溶解,再用正丁醇萃取4(40402020mL),分取正丁醇层,减压回收正丁醇至干,残渣用甲醇超声溶解,定容于5 mL 容量瓶中。0. 45μm膜过滤,进样量10μ l,测定波长254 nm

(甲醇法) 用四分法称取药材2.500g ,用甲醇超声提取3次,过滤提取液,滤液定容于25mL容量瓶中,用0.45μm膜过滤,进样量30μl,测定波长254nm
操作步骤:
  在选定的色谱条件下,分别吸取对照品和供试品溶液进样,测定峰面积值,按外标法计算含量
附件:
  点击下载 (解压密码:www.med126.com)
备注:
 
参考文献:
  封士兰,胡芳弟,赵健雄,徐静汶,陈立仁. 高效液相色谱法研究红芪指纹图谱. 分析化学. 2004,32(6): 710~714
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