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润肠口服液—大黄酚的测定—RP-HPLC
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方法名称:
  润肠口服液—大黄酚的测定—RP-HPLC
应用范围:
  本方法适用于润肠口服液中大黄酚含量的测定
方法原理:
 本品加甲醇-氯仿回流提取,经液相色谱分离,在257 nm处测定峰面积,外标法计算含量
仪器设备及实验条件:
 

仪器  SSI LabAlliance TM高效液相色谱仪,SSISeries IV Pump 泵,SSI M0del 201 DETECTOR检测器

色谱条件

色谱柱: Kromasil C18 5 μm250 ×4.6 mm)

流动相:甲醇—水—高氯酸(80 ∶20 ∶0. 1)

流速:1. 5 mL/min

检测波长:257 nm

柱温:30 ℃
试样制备:
 

对照品溶液制备    精密称取大黄酚对照品(80 ℃干燥1 h)2. 0 mg,置10 mL量瓶中,用甲醇—氯仿(1∶1)溶解并稀释至刻度,摇匀,即得(每1 mL中含大黄酚0. 2 mg)。

    供试品溶液制备    1)游离大黄酚:精密量取本品10 mL,水浴蒸干,加入甲醇-氯仿(1∶1)50 mL,称定重量,水浴回流1 h,冷至室温,补充甲醇-氯仿(1∶1)至原重,滤过,精密量取续滤液20 mL,水浴蒸干,残渣用甲醇-氯仿(1∶1)溶解,移入5 mL量瓶中,加甲醇-氯仿(1∶1)至刻度,摇匀。2)结合大黄酚:精密量取本品10 mL,加入5.0 mol/L的硫酸溶液10 mL,超声5 min,加入氯仿25 mL,水浴回流2 h,冷至室温,移入分液漏斗中,用少量氯仿洗涤容器2次,分取氯仿层,酸液用氯仿萃取2次(10 mL/次),合并氯仿层,用少量蒸馏水分2次洗涤,无水硫酸钠脱水50 ℃水浴减压回收溶剂至干。残渣加甲醇-氯仿(1∶1)使溶解并移入10 mL量瓶中,加甲醇-氯仿(1∶1)至刻度,摇匀。
操作步骤:
  分别精密吸取大黄酚对照液以及润肠口服液供试品溶液各10 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算大黄酚含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.med126.com)
备注:
 
参考文献:
  宋育航等. RP-HPLC 法测定润肠口服液中大黄酚含量. 现代中药研究与实践.2006,20(4):48~50
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