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含苦参制剂—洁阴净栓—苦参碱、连翘苷—HPLC
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方法名称:
  含苦参制剂—洁阴净栓—苦参碱连翘苷—HPLC
应用范围:
  本方法适用于洁阴净栓中苦参碱、连翘苷含量的测定
方法原理:
 本品加甲醇超声提取,经液相色谱分离,在220 nm处测定峰面积,外标法计算含量
仪器设备及实验条件:
 

仪器    高效液相色谱仪LC-10ASPD-10AVP紫外检测器(日本岛津);ANASTAR色谱数据处理系统

色谱条件    色谱柱:岛津Shim-pack VP-ODS柱(4.6 mm×250 mm);流动相:甲醇-0.02 %三乙胺溶液(55∶45);流速1.0 mL/min;检测波长:220 nm;柱温:40 ℃;进样量:20 μL
试样制备:
 

对照品溶液的制备    1)苦参碱对照品溶液的制备    精密称取苦参碱对照品4.9 mg,置25 mL量瓶中,加甲醇溶液溶解并稀释至刻度,制成每1 mL196 μg的溶液。2)连翘苷对照品溶液的制备    精密称取连翘苷对照品2.8 mg,置25 mL量瓶中,加甲醇溶液溶解并稀释至刻度,制成每1 mL112.0 μg的溶液。

供试品溶液的制备    1)苦参碱供试品溶液的制备  取洁阴净栓约2 g,切成碎块,精密称定,置具塞试管中,精密加入甲醇溶液10 mL,称重,浸渍过夜,40 ℃密塞超声处理2次,每次60 min,取出,冰浴冷却,再称定重量甲醇补足减失重量,取上清液5 mL,移置10 mL量瓶中,加甲醇至刻度,用0.45 μm微孔滤膜过滤,作供试品溶液。2)连翘苷供试品溶液的制备    取洁阴净栓约2 g,切成碎块,精密称定,置具塞试管中,精密加入甲醇溶液10 mL,称重,浸渍过夜,40 ℃密塞超声处理2次,每次60 min,取出,冰浴冷却,再称定重量,甲醇补足减失重量,取上清液5 mL,蒸至近干,加中性氧化铝0.5 g拌匀,加于中性氧化铝柱(100-120目,1 g,内径1.0 cm)上,用70 %乙醇80 mL洗脱,收集洗脱液,蒸干,甲醇溶解并移置5 mL量瓶中,加甲醇至刻度,用0.45 μm微孔滤膜过滤,作供试品溶液。
操作步骤:
  分别精密吸取苦参碱和连翘苷对照液以及洁阴净栓供试品溶液各20 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算苦参碱和连翘苷含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.med126.com)
备注:
 
参考文献:
  李雁华.HPLC法测定洁阴净栓中苦参碱和连翘苷的含量.中成药. 2005.27(12):1404~1407
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