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关木通-马兜铃酸A的含量测定-HPLC
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方法名称:
  关木通-马兜铃酸A的含量测定-HPLC
应用范围:
  用于关木通马兜铃酸A的含量测定
方法原理:
 本品细粉加甲醇回流提取,经液相色谱分离,在315 nm处测定峰面积,外标法计算含量
仪器设备及实验条件:
 

仪器    Applied Biosystems 785A检测器,Perkinelmer Series 2000泵,HW色谱工作站(南京千谱软件有限公司)

色谱条件    色谱柱:Nova -Pak C18 (150 mm×4. 6 mm,5 μm);流动相:甲醇-水-冰醋酸(60:39:1);流速:1. 0 mL/min;检测波长:315 nm;柱温:室温;进样量:20 μL
试样制备:
 

对照品溶液制备    精密称定马兜铃酸A对照品适量,加甲醇配制成204 μg/mL的对照品储备液,即得。

供试品溶液制备    1)药材样品:取过40目筛的关木通药材粉末2 g,精密称定,用滤纸包裹后置索氏提取器中,加入甲醇200 mL,95 ℃恒温水浴提取8 h,回收甲醇,加少量甲醇定容于25 mL量瓶中,用0.45 μm微孔滤膜过滤,精密量取续滤液1 mL,置5 mL量瓶中,用甲醇定容,摇匀,即得。2)水煎液样品:精密量取复方水煎液样品(龙胆泻肝汤)25 mL,用0.5 mol/L NaOH溶液调pH10,氯仿萃取(25 mL×2),碱液用3 mol/L盐酸溶液调pH2,然后用氯仿萃取(25 mL×3),合并氯仿液,水浴回收氯仿,残渣用甲醇溶解并定容于25 mL量瓶中,用0.45 μm微孔滤膜过滤,取续滤液,即得。同法平行制备复方阴性提取样品和关木通单煎液提取样品。
操作步骤:
  分别精密吸取马兜铃酸A对照液以及关木通药材样品、3种水煎液供试品溶液各20 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算马兜铃酸A含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.med126.com)
备注:
 
参考文献:
  蒋晔,郝福,李艳荣登. HPLC测定关木通配伍前后马兜铃酸A煎出量的变化.华西药学杂志. 2007,22(1):093~095
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