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人工虫草--麦角甾醇的含量测定--HPLC法
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方法名称:
  人工虫草--麦角甾醇的含量测定--HPLC法
应用范围:
  测定人工虫草中麦角甾醇的含量
方法原理:
 样品以加饱和KOH回流皂化,用环己烷提取,提取液经硅藻土、硅胶H柱净化,经液相色谱仪分离,在282nm测定峰面积,标准曲线法测定的麦角甾醇含量。
仪器设备及实验条件:
 

仪器设备  Shimadzu 高效液相色谱仪,SPD210A 紫外检测器,LC-10AD高压泵,DGU-4A 脱气机,CT0210A 恒温箱,C-R6A记录仪;

 色谱条件 色谱柱:Irreguler C18 (250nm×4.6mm,10μm);检测波长:282nm,流动相:甲醇;流速:1.3mL/min;检测器灵敏度:0.04 AUFS,记录仪纸速:2mm/min ;柱温:29℃。
试样制备:
 

标准曲线  精密称取麦角甾醇对照品5.70mg用无水乙醇溶解,定量至25 ml,得228.0g/mL的贮备液。从贮备液中分别精密吸取0.20.81.62.44.2 mL,用无水乙醇稀释至5mL。按色谱条件进样20μL ,以峰面积对麦角甾醇的浓度行回归,即得。

供试品溶液的制备  精密称取虫草粉(过80目筛)约0.1g,加饱和KOH 溶液0.5mL,无水乙醇5mL,水浴中回流皂化1 h ,冷却,用环己烷提取3次,每次5mL。提取液先经硅藻土-水柱除去少量乙醇和水溶性杂质,再经硅胶H柱保留麦角甾醇,弃去环己烷,加5mL无水乙醇洗脱麦角甾醇,即得。
操作步骤:
  按色谱条件进样20μL,记录色谱峰面积,用标准曲线法计算其含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.med126.com)
备注:
 
参考文献:
  段韶军,张忠鹏,李菲菲等.高效液相色谱法测定人工虫草中麦角甾醇的含量.山西医科大学学报.2006,37(6):611-612
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