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络石藤—络石苷的测定—RP-HPLC
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方法名称:
  络石藤—络石苷的测定— RP-HPLC
应用范围:
  本方法适用于络石藤中络石苷含量的测定
方法原理:
 本品粉末加甲醇超声提取,经液相色谱分离,在225 nm处测定峰面积,外标法计算含量
仪器设备及实验条件:
 

仪器    高效液相色谱仪(美国Waters公司,515泵),Waters2478 UV检测器,7725i手动进样阀

   试剂    络石苷对照品为自制

    色谱条件    色谱柱:Symmetry C18柱(4.6 mm×150mm,5 μm);流动相:甲醇-0.1 %磷酸溶液(33.3:66.7);流速1.0 mL/min;检测波长:225 nm;进样量:l0 μL;柱温:28 ℃
试样制备:
 

对照品溶液制备    精密称取络石苷对照品10.50 mg25 mL量瓶中,用25 %乙腈定容(420 μg/mL)成储备液,即得,用时适当稀释。

    供试品溶液制备    取本品粉末10 g,精密称定,置250 mL烧瓶中用甲醇加热回流提取3次,每次150 mL,滤过,合并滤液,回收甲醇至近干,加500 mL蒸馏水,通过AB-8大孔吸附树脂柱(内径1.0 cm,长20 cm),用20 %乙醇1000 mL洗脱,再用40 %乙醇1000 mL洗脱,收集40 %乙醇洗脱液,回收至干,残渣加甲醇定量转移至250 mL量瓶中定容,摇匀,用0.45 μm微孔滤膜滤过,即得供试品溶液。
操作步骤:
  分别精密吸取络石苷对照液以及络石藤供试品溶液各10 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算络石苷含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.med126.com)
备注:
 
参考文献:
  朱三华,陈海生,谭兴起等. RP-HPLC法测定络石藤中的络石苷含量. 中国现代应用药学杂志.2006, 23(3):215~217
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