方法名称： |
东北红豆杉枝叶—10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ的测定—HPLC-UV |
应用范围： |
用于东北红豆杉枝叶中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ含量的测定 |
方法原理： |
本品粉末用甲醇-二氯甲烷(1∶1) 超声提取，经液相色谱仪分离，在233.9nm测定，外标法计算10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ的含量 |
仪器设备及实验条件： |
仪器设备 W aters 600 型HPLC色谱仪；，W aters 996 二极管阵列检测器； 色谱条件 色谱柱：C18 色谱柱(250mm×4.6 mm，5µm )；流动相：甲醇-乙腈-水(20∶30∶50)；检测波长：233.9 nm；流速：0.8mL /m in； 柱温：32℃；进样量：10µL。 |
试样制备： |
对照品溶液制备 精密称取10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ 对照品500 µg于10mL量瓶中以甲醇溶解并定容，即得对照品储备液(47.5 µg/mL )，即将对照品储备液稀释成14.25µg/mL的溶液即得。 供试品溶液的制备 精密称取样品粉末80mg于250mL三角瓶中，加入甲醇-二氯甲烷(1∶1) 50mL浸泡24h，超声提取40min，滤过，残渣以甲醇冲洗3 次，合并滤液，30 ℃水浴浓缩，加入二氯甲烷2水(1∶1) 50 mL 萃取，水层再以二氯甲烷萃取两次，合并滤液于30℃水浴挥干溶剂，用10mL甲醇溶解，用0.45 µm 滤膜滤过，即得。 |
操作步骤： |
精密吸取对照液以及供试品溶液1Oμl，分别注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积，按外标法计算样品中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ的含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
杜智敏，陈瑞玲，刘福清等. 高效液相色谱法测定东北红豆杉枝叶中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ的含量. 中草药.2004，35（4)：398～399 |
