方法名称: |
龙葵药材-澳洲茄碱、澳洲茄边碱含量测定-HPLC-UV |
应用范围: |
用于龙葵药材-澳洲茄碱、澳洲茄边碱含量测定 |
方法原理: |
本品粗粉加甲醇回流提取,经液相色谱分离,在203 nm处测定峰面积,外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件: |
仪器设备及药品 英国Micromass 公司LCT(TOFMS) 高分辨质谱仪;Bruker AV-500 核磁共振波谱仪(TMS 为内标);Agilent 1100 液相色谱仪,DAD 检测器含在线脱气、二元高压泵、自动进样器、柱温箱 色谱条件 色谱柱:ZORBAX Eclipse XDB C18 (4.6 mm ×150 mm,5 μm);流动相:乙腈- 2 mmol/L Na2 HPO4 水溶液(39 :61);检测波长:203 nm;柱温: 30 ℃;流速:1 mL/min;进样量:2 μL |
试样制备: |
对照品溶液制备 精密称取经五氧化二磷干燥48 h的澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品适量,分别加甲醇制成每1 mL 中含0.5 mg的溶液,即得。 供试品溶液制备 精密称定龙葵药材粗粉10 g,精中入300 mL甲醇,精密称定,回流提取2 h,放冷,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液150 mL,减压浓缩至干,加1 % HCl 40 mL溶解浸膏,上预处理过的10 g HPD100大孔树脂进行纯化,分别用150 mL水、15 %乙醇、70 %乙醇洗脱,收集70 %乙醇洗脱部分,减压浓缩至干,甲醇溶解并定容至5 mL,以0.45 μm的微孔滤膜滤过,取续滤液即得。 |
操作步骤: |
分别精密吸取澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照液以及龙葵供试品溶液各2 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算澳洲茄碱、澳洲茄边碱含量。 |
附件: |
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备注: |
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参考文献: |
李明慧,丁岗,孟兆青等.龙葵药材中澳洲茄碱、澳洲茄边碱的含量测定.中国天然读物. 2007,5(5):360~362 |