方法名称： |
贯叶连翘及提取物-金丝桃苷的含量测定-HPLC-UV |
应用范围： |
用于贯叶连翘及提取物中金丝桃苷的含量测定 |
方法原理： |
本品细粉加甲醇超声提取，经液相色谱分离，在360 nm处测定峰面积，外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件： |
仪器 美国Agilent 1100 型高效液相色谱仪（含四元梯度泵、在线真空脱气机、自动进样器、柱温箱、二极管阵列检测器、ChemStation色谱工作站) 色谱条件 色谱柱：依利特Kromasil C18（ 4. 6 mm×200 mm，5 μm)；流动相：甲醇-0. 5%磷酸（ 45：55，v/v，用三乙胺调pH至3. 0)；流速：1. 0 mL/min；检测波长：360 nm；柱温：35 ℃ |
试样制备： |
对照品溶液的制备 精密称取金丝桃苷对照品4. 93 mg，置5 mL棕色量瓶中，加甲醇超声溶解并稀释至刻度，摇匀制得0. 986 mg/mL对照品贮备液。从中精密量取200 μL加甲醇稀释至1 mL棕色量瓶，制成0. 1972 mg/mL对照品溶液。 供试品溶液的制备 1)原药材供试品溶液的制备：取贯叶连翘药材粉碎，过80目筛，混匀，称取28 mg，精密称定，置5 mL量瓶中，加适量甲醇，超声处理30 min溶解，加甲醇稀释至刻度，摇匀，以5000 r/min离心5 min，取上清液经0. 20 μm PTFE滤膜过滤，取续滤液，即得。2)提取物供试品溶液的制备：称取贯叶连翘提取物15 mg，精密称定，置10 mL棕色量瓶中，加适量甲醇，超声处理30 min溶解，加甲醇稀释至刻度，经0. 20 μm PTFE 滤膜过滤，取续滤液，即得提取物供试品溶液。 |
操作步骤： |
分别精密吸取金丝桃苷对照液以及贯叶连翘及提取物供试品溶液适量，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算金丝桃苷含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
张俊松，王晓利，罗谦，等. HPLC测定贯叶连翘及提取物中伪金丝桃素和金丝桃苷的含量. 中成药.2006，28（5)：709~712 |
