方法名称: |
青木香—马兜铃酸A的含量测定—HPLC |
应用范围: |
本方法适用于青木香中马兜铃酸A含量的测定 |
方法原理: |
本品细粉加水回流提取,经液相色谱分离,在319 nm处测定峰面积,外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件: |
仪器 岛津LC一10A型高效液相色谱仪,SPD一10型榆测器,CLASS—VP色谱工作站(日本岛津) 色谱条件 色谱柱:岛津ODS柱(150 mm×6 mm,5 μm);流动相:甲醇-水-磷酸(60 ∶40∶0.1) ;检测波长:319 nm;流速:1.0 mL/min;柱温:25 ℃ |
试样制备: |
对照品溶液制备 精密称定马兜铃酸A对照品3.3 mg,置50 mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀即得(每1 mL含马兜铃酸A 0.0660 mg)对照品溶液。 供试品溶液制备 取样品粉末6 g,精密称定,加水适量,小火煎煮1 h,定量转移至100 mL量瓶中,加水至刻度,摇匀静置,精密吸取上清液50 mL,置100 mL量瓶中,加乙醇至刻度,摇匀,静置沉淀,精密吸取上清液50 mL置蒸发皿中,水浴挥去乙醇,至无醇味,转移至分液漏斗中,用少量水洗涤容器,并人分液漏斗中,加稀盐酸酸化调节pH值至4以下,加氯仿萃取3次(20、l5、l5 mL),分取氯仿萃取液,合并,挥干,残渣加甲醇使溶解,定鼍转移至10 mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,分别用0.45 μm的微孔滤膜滤过,即得供试品溶液。 |
操作步骤: |
分别精密吸取马兜铃酸A对照液以及供试品溶液适量,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算马兜铃酸A含量。 |
附件: |
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备注: |
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参考文献: |
赵慧,陈涛,杨秀丽. 青木香中马兜铃酸A的含量测定方法. 中国药业. 2006,15(2):45~45 |