方法名称： |
苦豆草—槐定碱的含量测定—HPLC-UV |
应用范围： |
本方法适用于苦豆草中槐定碱含量的测定 |
方法原理： |
本品粗粉加5 %冰醋酸超声提取，碱性条件下氯仿萃取，经液相色谱分离，在220±1 nm处测定峰面积，外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件： |
仪器 日本岛津LC-10A高效液相色谱仪，SPD-10A紫外检测仪；威玛多媒体色谱数据工作站。 色谱条件 色谱柱：Spherisorb NH2 柱（250 mm×4 mm)；流动相：乙腈—磷酸水溶液（pH1.6)—无水乙醇（80∶8：10)；检测波长：220±1 nm；流速：1 mL/min |
试样制备： |
对照品溶液制备 精密称槐定碱对照品2 mg置于25 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。 供试品溶液制备 取样品粗粉（过40目筛)1.5 g，精密称定，置100 mL三角瓶中，加入5 %冰醋酸溶液50 mL，振摇2分钟，放置2小时，超声处理30分钟，滤过。精密吸取滤液5 mL，置分液漏斗中，用氨水调pH至11，加氯化钠1.7 g，氯仿提取5次（10，5，5，5，5 mL)，分取氯仿提取液，用0.5 mol/L盐酸溶液提取5次（10，5，5，5，5 mL)，分取盐酸提取液，用氨水调pH至11，用氯仿提取5次（10，5，5，5，5 mL)，分取氯仿提取液，置水浴上蒸干。残渣加甲醇移至5 mL量瓶中，用甲醇洗涤容器并稀释至刻度。摇匀，微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。 |
操作步骤： |
分别精密吸取槐定碱对照液以及苦豆草供试品溶液各20 μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算槐定碱含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
姜平川，梁文法，陈英.苦豆草中槐定碱含量的HPLC测定. 中药材.1999，22（10)：515～515 |
