方法名称: |
灯盏细辛--野黄芩苷含量测定--HPLC法 |
应用范围: |
灯盏细辛药材中野黄芩苷的含量测定 |
方法原理: |
灯盏细辛经50%乙醇超声提取,提取液水溶解后以乙酸乙酯萃取,水层用流动相(乙腈-水-四氢呋喃-磷酸,15:85:1.5:0.1)溶解,经液相色谱仪分离,在335nm处测定峰面积,外标法计算含量。 |
仪器设备及实验条件: |
仪器设备 LC-10AD高效液相色谱仪,SPD-10A紫外可见检测器,CLASS-LC10色谱工作站; 色谱条件 色谱柱:Hypersil-ODS 2(200mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-水-四氢呋喃-磷酸(15:85:1.5:0.1);流速:0.8ml/min;检测波长:335nm;柱温:30℃。 |
试样制备: |
对照品溶液的制备 精密称定野黄芩苷对照品适量置50ml量瓶中,用甲醇溶解并定容,制成浓度为0.224mg/ml的溶液,摇匀,即得。 供试品溶液的制备 取干燥的药材粉末约0.5g,精密称定,置干燥锥形瓶中,用50%乙醇10ml超声提取3次,每次20min,滤过,合并滤液,减压挥干,用水30ml溶解并称量转移至125ml分液漏斗中,用乙酸乙酯萃取3次,每次30ml,弃去有机层,收集水层减压挥干,用流动相溶解并定量转移至50ml量瓶中,定容,摇匀,即得。 |
操作步骤: |
分别精密对照品溶液与供试品溶液20μl,按上述色谱条件注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定,外标法计算样品中灯盏乙素的含量。 |
附件: |
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备注: |
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参考文献: |
林燕芝,陈晓辉,唐星等.RP-HPLC测定灯盏细辛中野黄芩苷的含量.药物分析杂志.2005,25(5):594-596 |