方法名称： |
灯盏细辛--灯盏乙素含量测定--HPLC法 |
应用范围： |
测定灯盏细辛全草、根、茎、叶和花中中灯盏乙素的含量 |
方法原理： |
灯盏细辛经水回流提取，经液相色谱仪分离，在286nm处测定峰面积，外标法计算含量。 |
仪器设备及实验条件： |
仪器设备 岛津LC - 6A 高效液相色谱仪(LC-6A泵，CTO-6A柱温箱，SPD-6AV检测器，SCL-6A系统控制器)；LC2000色谱工作站(中科院成都分院提供)； 色谱条件 色谱柱：天津凯德科学仪器有限公司Kromasil C18(250mm×4.6mm,5μm)；流动相：乙腈-水-磷酸(18∶82∶0.2)；流速：0.8mL/min；检测波长：286nm;柱温：45℃。 |
试样制备： |
对照品溶液的制备 精密称取干燥的灯盏乙素对照品适量，在浓度范围为0.0132mg/mL~0.0396mg/mL以无水乙醇溶解并稀释成两份对照品溶液，即得。 供试品溶液的制备 分别取灯盏细辛全草、花、叶、茎和根各约0.5g精密称定，各以水50mL、40mL分别回流提取2次，每次1h，回流液转移至100mL量瓶中并以水稀释至刻度。各取5mL，置25mL量瓶中以水稀释至刻度，摇匀，即得。 |
操作步骤： |
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液20μl，按上述色谱条件测定，外标两点法计算样品中灯盏乙素的含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
杨文宇,张艺,段俊国.高效液相色谱法测定灯盏细辛中灯盏乙素的含量.成都中医药大学学报.2001,24（3)：37-38,41 |
