| 公开(公告)号 | CN1888065A |
| 公开(公告)日 | 2007.01.03 |
| 申请(专利)号 | CN200610036646.0 |
| 申请日期 | 2006.07.21 |
| 专利名称 | 重组美洲大蠊过敏原蛋白的表达方法 |
| 主分类号 | C12N15/09(2006.01)I |
| 分类号 | C12N15/09(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 汕头大学医学院 |
| 发明(设计)人 | 何韶衡;张忠芳 |
| 地址 | 515031广东省汕头市新陵路22号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 广州粤高专利代理有限公司 |
| 代理人 | 陈 卫 |
| 国省代码 | 广东;44 |
| 主权项 | 一种重组美洲大蠊过敏原蛋白Per a 1.0101、Per a 1.0102、Per a 1.0104或Per a 7.01的表达方法，其特征在于包括如下步骤： (1)从美洲大蠊组织中提取总RNA； (2)合成引物： pET-Per a 1.0101-P1 CATATGGAGTTCCAGAGCATTATCTCAAC pET-Per a 1.0101-P2 AAGCTTTCAGGGCAGGCCGAACAAG pET-Per a 1.0102-P1 CATATGAGCATTATCTCAACTCTAAATGCCATGCC pET-Per a 1.0102-P2 AAGCTTTCAGGGCAGGCCGAACAAGCTGC pET-Per a 1.0104-P1 CATATGGTTGGTGTCGATGGTCTCATAGAC pET-Per a 1.0104-P2 AAGCTTTCAGGGCAGGCCGAACCAG pET-Per a 7.01-P1 GAATTCGACGCGATCAAGAAGAAGATG pET-Per a 7.01-P2 GCGGCCGCGTTGCCAATAAGTTCGGTGAAAG (3)以总RNA为模板，通过RT-PCR获得美洲大蠊过敏原蛋白编码基因片段； (4)将编码基因克隆入原核表达载体中，转化宿主菌，培养所得重组工程菌，然后诱导其表达目的蛋白； (5)采用亲和层析方法对目的蛋白进行纯化，从而获得重组美洲大蠊过敏原蛋白Per a 1.0101、Per a 1.0102、Per a 1.0104或Per a 7.01。 |
| 摘要 | 本发明涉及生物技术领域，公开了一种重组美洲大蠊过敏原蛋白的表达方法。本发明的目的是针对蟑螂过敏原浸提液进行免疫耐受治疗的不足，从常见的蟑螂种属美洲大蠊组织中提取总RNA，扩增出美洲大蠊主要过敏原基因Per a1.0101、Per a 1.0102、Per a 1.0104、Per a 7.01的编码基因，通过基因工程手段，在大肠杆菌中低温诱导表达重组蟑螂过敏原蛋白，可用于蟑螂引起的过敏反应疾病的诊断和治疗，避免了天然提取物的非单一性及标准化难的障碍。 |
| 国际公布 |
