| 公开(公告)号 | CN1244694C |
| 公开(公告)日 | 2006.03.08 |
| 申请(专利)号 | CN00113802.2 |
| 申请日期 | 2000.04.28 |
| 专利名称 | 牦牛血超氧化物歧化酶制备方法 |
| 主分类号 | C12N9/08(2006.01)I |
| 分类号 | C12N9/08(2006.01)I;C07K1/36(2006.01)I;A61K38/44(2006.01)I;A61K8/66(2006.01)I;A23L1/30(2006.01)I;A61P25/28(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 苏 普 |
| 发明(设计)人 | 苏 普 |
| 地址 | 730050甘肃省兰州市小西湖硷沟沿211号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 兰州中科华西专利代理有限公司 |
| 代理人 | 王玉双 |
| 国省代码 | 甘肃;62 |
| 主权项 | 一种牦牛血超氧化物歧化酶的制备方法，其特征在于包括下述工艺步骤：①将牦牛血除去血浆得红血球，用红血球体积的2-4倍、0.5-1.5％的盐液清洗红血球2-6次，再往红血球内加入体积比为1∶(0.5-1.5)的水，搅拌后使其溶血；②将溶血液冷却至-4-4℃，搅拌加入溶血液体积的0.15-0.35倍、温度为至少-10℃、90-98％的醇和溶血液体积的0.1-0.2倍、90-98％的氯仿，混合搅拌，再加入溶血液体积的0.2倍的水稀释，离心去除杂蛋白，得蛋黄色上清液，测定其SOD总活力；③将乙醇相上清液升至室混，加入上清液体积的0.5-1.5倍的固体磷酸氢二钾溶解，静置分离得上清液，上相液含有氯仿、醇和少量盐，离心上相液得淡蓝色上清液；④将③步中最后的上清液冷却至至少0℃，边搅边加入上清液体积的0.5-1倍、温度为至少-10℃的丙酮，离心后得蓝绿色沉淀，然后往沉淀物中加入沉淀物体积的0.5-1.5倍的水溶解；溶解液放透析袋中相对于2.5mM、pH7.6的KH2PO4-K2HPO4缓冲液透析，离心透析液得淡绿色清液；⑤将淡绿色清液超滤即得牦牛血红胞超氧化物歧化酶。 |
| 摘要 | 本发明涉及一种牦牛血超氧化物歧化酶及其提取纯化工艺和应用，所述的超氧化物歧化酶是将牦牛血经去血浆、洗涤、溶血、抽提去杂蛋白、分离、沉淀、透析、超滤浓缩后得到牦牛血SOD；本发明的酶总活力高达90万单位/l，平均酶比活为13000u/mg，本发明的工艺可减少SOD的酶总活损失，得率高、生产周期短、使用试剂省、操作简单；本发明可作药品、保健品和食品、化妆品添加剂用。 |
| 国际公布 |
