猪瘟单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验抗原

本抗原系分别用猪瘟病毒兔化弱毒株和猪瘟病毒强毒株，分别接种细胞培养，收获培养物，通过亲和层析法，利用猪瘟病毒兔化弱毒株特异性单克隆抗体和猪瘟病毒强毒株特异性单克隆抗体纯化制成。用于检测猪瘟兔化弱毒疫苗免疫抗体和猪瘟病毒强毒抗体。

【性状】本抗原为微乳白色，无异物的透明液体。

【作用与用途】用于检测猪瘟兔化弱毒疫苗免疫抗体和猪瘟病毒强毒抗体的酶联免疫吸附试验。

【用法与判定】(1)用法 a.用包被液将猪瘟弱毒、强毒单抗纯化酶联抗原分别作100倍稀释，以100uL分别加到做好标记的酶联板各孔中，置湿盒于2-8℃过夜。b.倒去孔内液体，用洗涤液洗板3次，每次间隔3-5min，拍干。c.用稀释液将待检血清作100倍稀释后，每孔100uL。同时，将猪瘟阳性、阴性血清以100倍稀释作对照，置37℃1.5-2h。d.重复b。e.用稀释液将兔抗猪IgG-辣根过氧化物酶结合物作100倍稀释，每孔加入100uL，置37℃1.5-2h。f.重复b。g.每孔加入底物溶液(邻苯二胺5mg+底物缓冲液5mL+30％过氧化氢18.75uL)100uL，室温中约l0-30min后，观察显色反应。h.每孔加入终止液50/uL，于酶联读数仪上测定在490nm波长处的光密度(OD)。(2)判定 在弱毒酶联板上：OD≥0.2，为猪瘟弱毒抗体阳性；OD<0.2，为猪瘟弱毒抗体阴性。在强毒酶www.med126.com联板上：OD≥0.5，为猪瘟强毒抗体阳性；OD<0.5，为猪瘟强毒抗体阴性。在弱毒与强毒酶联板上，阳性对照血清应为阳性；阴性对照血清应为阴性。

【贮藏】在-15℃，有效期为1年；在2-8℃为6个月。