1.血清标本 测定血液中某些物质的含量(如非蛋白氮,尿素氮等)。
2.血清标本 测定血清酶、脂类、电解质和肝功能等。
3.血培养标本 查找血液中的病原体(如伤寒杆菌培养等)。
一般常规检验用毛细血管采血法,这种采血法由检验人员执行,血清生化及细菌培养等检验因需要较多量的血液,一般由护理人员协助采血。目前不少生化项目检验已采用微量测定法,故也可采用毛细血管采血法采标本。
(二)静脉采血法
1.用物 同静脉注射法,备干燥注射器(5-10ml),7号针头,标本容器(按需要备干燥试管、抗凝管或血培养瓶),酒精灯,火柴等。
2.操作方法
(1)备齐用物,贴好标签,核对无误后按静脉穿刺法采取所需血量,立即卸下针头,将血液沿管壁缓慢注入试管内,切勿将泡沫注入,避免震荡,以防红细胞破裂而造成溶血。因血液中细胞的内外成分有很大差异,如细胞内钾离子浓度是细胞外的20倍,细胞内的某些酶含量也较细胞外高,如发生溶血,则直接影响检验结果的准确性。
(2)如需全血、血浆,可将血液如上法注入盛有抗凝剂的试管内,立即轻轻摇动,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。如需作二氧化碳结合力测定时,抽取血液后,应立即注入有石蜡油的抗凝试管中,注入时针头应插入石蜡油面以下,以隔绝空气,立即送验。否则血液中二氧化碳逸出,使检验结果降低,影响准确性。
(3)采集血培养标本时,应防止污染。静脉采血后,将血液注入培养瓶内,一般培养标本用肉汤培养瓶,如做伤寒杆菌培养则备胆汁培养瓶。
临床常用的培养瓶有两种,一种是密封瓶,瓶口除橡胶塞外另加铝盖密封。瓶内盛培养液约50ml,经高压灭菌,使用时将铝盖剔去,用2%碘酒和70%酒精消毒瓶盖,更换针头将抽出的血液注入瓶内,摇匀后送验。另一种是三角烧瓶,瓶口以棉花塞子及纸严密包封,使用时先将封瓶纸松开,取血后将棉塞取出迅速在酒精灯火焰上消毒瓶口,将血液注入瓶内,轻轻摇匀,再将棉塞经火焰消毒后盖好,扎紧封瓶纸送验。一般血培养取血5ml,亚急性细菌性心内膜炎病人,因血中细菌数目较少,为提高细菌培养阳性率,应取血10-15ml.
(4)采血完毕,连同检验单及时送验,清理用物,归还原处。一次性注射器使用后应经消毒液浸泡集中处理。
血液标本采集所需血量视检验目的而定,各医院检验方法不同,其采血量也各异。下面介绍常用检验项目全血、血清标本和放射免疫检验采血量与要求(表17-1,17-2,17-3,17-4)。
表17-1常用全血标本采血量与要求(不需空腹)
检验项目 | 采血量(ml) | 标本容器 | 要求 |
血氨(BA) | 5.0 | 肝素抗凝 | 立即送验 |
血液酸碱度(pH) | 2.0 | 肝素抗凝 | 空针肝素化后方可采血 |
二氧化碳分压(PaO2) | 2.0 | 肝素抗凝 | 隔绝空气 |
氧分压(PaO2) | 2.0 | 肝素抗凝 | 隔绝空气 |
碳酸氢盐 | 2.0 | 肝素抗凝 | 隔绝空气 |
表17-2 常用全血标本采血量与要求(空腹)
检验项目 | 采血量(ml) | 标本容器 | 要求 |
血沉ESR | 1.6 | 3.8% 枸橼酸钠溶液0.4ml | 充分混匀及时送验 |
血糖BG | 1~2 | 抗凝瓶 | 充分混匀及时送验 |
二氧化碳结合力(CO2-Cp) | 2.0 | 抗凝瓶 | 充分混匀及时送验 |
非蛋白氮(NPN) | 2.0 | 抗凝瓶 | 充分混匀及时送验 |
尿素氮(BuN) | 2.0 | 抗凝瓶 | 充分混匀及时送验 |
红细胞比积(Hct) | 2.0 | 抗凝瓶 | 充分混匀及时送验 |
肌肝(Cr) | 3.0 | 抗凝瓶 | 充分混匀及时送验 |
肌酸(Cre) | |||
凝血酶元活动度及时间(PT) | 1.8 | 试管内盛3.13%枸橼酸钠0.2ml | 充分混匀及时送验 |
纤维蛋白元(Fb) | 2.0 | 抗凝瓶 | 充分混匀及时送验 |
E-玫瑰花结形成试验(ERT) | 2.0 | 肝素抗凝 | |
HDL-胆固醇 | 2.0 | 不抗凝 |
表17-3放射免疫检验采血量与要求
检验项目 | 采血量(ml) | 要求 | |||
甲状腺功能测定 | 总三碘甲状腺原氨酸(TT3) 总甲状腺素(TT4) 促甲状腺激素(TSH) 甲状腺球蛋白抗体(TGA) 甲状腺微粒体抗体(MCA) 3、3,、5,、三碘甲状腺原氨酸γt3 | 4.0 | 防止溶血 防止溶血 防止溶血 防止溶血 防止溶血 防止溶血 | ||
乙肝检测 | 表面抗原(HBsAg) 表面抗体(HBsAb) e 抗原(HBsAg) e抗体(HBeAb) 核心抗原HBcAg 核心抗体HBcAb | 4.0 | 空腹采血防止溶血 | ||
表17-4常用血清标本采血量与要求
检验项目 | 采血量ml | 多项目合并采血量 | 标本容器 | 要求 | |
丙氨酸氨基转移酶(ALT) 门冬氨酸氨基转移酶(AST) 胎儿甲种球蛋白(AFP) 乙肝表面抗原(HBsAg) | 1.0 1.0 1.0 1.0 | 4ml | 干燥试管 干燥试管 干燥试管 干燥试管 | 空腹抽血严防溶血 空腹抽血严防溶血 空腹抽血严防溶血 空腹抽血严防溶血 | |
黄疸指数(Ⅱ) 总胆红素(TBIL) | 2.0 2.0 | 3ml | 干燥试管 干燥试管 | 空腹抽血严防溶血 空腹抽血严防溶血 | |
总胆固醇(Chol) 胆固醇脂(Choiesl) 三酸甘油酯(TC) | 2.0 2.0 2.0 | 3ml | 干燥试管 干燥试管 干燥试管 | 空腹抽血严防溶血 空腹抽血严防溶血 空腹抽血严防溶血 | |
血清蛋白(A/G) 蛋白电泳(SPE) | 3.0 2.0 | 3ml | 干燥试管 干燥试管 | 严防溶血 严防溶血 | |
碱性磷酸酶(AKP) 血清淀粉酶(AMS) 乳酸脱氢酶(LDH) | 2.0 3.0 3.0 | 干燥试管 干燥试管 干燥试管 | 严防溶血 严防溶血 严防溶血 | ||
血钾(K) 血纳(Na) 血钙(Ca) 血氯化物(Cl) | 2.0 2.0 2.0 2.0 | 3ml | 干燥试管 干燥试管 干燥试管 干燥试管 | 严防溶血 严防溶血 严防灰尘污染 严防灰尘污染 | |
γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT) 肥达氏反应(Widal sreaction) 抗O(ASO) 红斑狼疮细胞(LES) | 2.0 3.0 3.0 5.0 | 干燥试管 干燥试管 干燥试管 干燥试管 | 空腹抽血严防溶血 严防灰尘污染 严防灰尘污染 写明时间及时送验 | ||
3.注意事项
(1)根据不同的检验目的,计算所需的采血量,选择试管。
(2)需空腹抽血时,应事先通知病人,避免因进食而影响检验结果(因清晨空腹时血液中的各种化学成分处于相对恒定状态)。
(3)采集血标本应严格执行无菌技术操作,严禁在输液、输血的针头或皮管内抽取血标本,应在对侧肢体采血。
(4)如同时抽取几个项目的血标本,一般应先注入血培养瓶,其次注入抗凝管,最后注入干燥试管,动作要准确迅速。
(5)取血后,应将注射器的活塞略向后抽,以免血液凝固而使注射器粘连并阻塞针头。
(三)动脉采血法(以作血气分析为例)
1.用物 同静脉穿刺法,另加肝素抗凝剂(表17-5),橡皮泥或橡皮塞。
2.部位 多选用桡动脉、肱动脉、股动脉。
3.操作方法 用2 ml注射器,连接7号针头,吸1:500肝素生理盐水溶液1ml,将活塞来回抽动,使内壁沾匀肝素,再推掉全部肝素溶液,将活塞推至空筒顶端后不再回拉,以保持注射器内无空气。选择动脉(桡动脉采血比较方便),常规消毒病人的皮肤及操作者的左手食、中指后,以左手绷紧皮肤,右手持注射器,用左手食指触摸动脉搏动处,以45度角进针,见血液自动加入空筒内至2ml后拔出针头,嘱病人按压局部5分钟,应立即用橡皮泥或橡皮塞封闭针头(针头斜面埋入橡皮中即可),以隔绝空气,在手中搓动注射器,使血与肝素混合,立即送验。
表17-5 常用血液抗凝剂
剂名 | 抗凝力 | 机理 | 应用 | 禁忌 |
10%草酸钾 | 0.2ml抗凝10ml的血 | 与Ca++结合成不溶性草酸钙而抗凝血 | 非蛋白氮二氧化碳结合力 | 血K+ 血Ca+ |
草酸钠 | 1 ~2mg抗凝1ml的血 | 与Ca++结合成不溶性草酸钙而抗凝血 | 凝血酶原时间及复钙时间测定 | 血Na+ 血Ca+ |
3.8%枸橼酸钠 | 6mg抗凝1ml的血 | 与血中生成不溶性离子化的枸橼酸钙,阻止血液凝固 | 血沉1:4 输血1:9 | |
双草酸盐(草酸钾、草酸胺) | 0.5ml抗凝5ml的血 | 保持红细胞形态不变 | RBC压积测定 | |
草酸钾 氟化钠 | 0.1ml抗凝1ml的血 | 抑制葡萄糖分解而保持血糖浓度 | 血糖测定 | BW N(尿素氮) |
肝素 | 0.1ml抗凝5~10ml的血 | 抑制凝血酶元转为凝血酶 | 血氨 血气分析 |
4.注意事项
(1)血标本必须隔绝空气。因为血气分析是指当天大气压条件下,用隔绝空气的血标本与一定浓度的气体相结合,而后测定人体内PH值、氧分压等,作为监测及追踪观察病人的血气情况。血标本中若进入空气将产生误差。因此采血的注射器使用前应检查有无漏气,针头必须连接紧密,标本采集后立即封闭针头斜面。
(2)及时送验。标本采集后应立即送验,如要等待测定,应将标本置于0到4度冰箱内保存不得超过1小时,以免影响检验结果。
(一)尿常规标本
1.目的 检查尿液的色泽、透明度、比重、尿量、尿蛋白、尿糖定性、细胞和管型等。
2.用物 容量在100ml以上的清洁玻璃瓶1个。
3.操作方法
①备容器贴检验单副联,注明病区、床号、姓名等。
②当晚并待病人留取翌日晨第一次尿液约100ml于标本瓶内。由于晨尿浓度较高,且不受饮食的影响,检验结果更具参考意义。
③留取尿标本时,不可将粪便混于尿液中,以防粪便中的微生物使尿液变质。
④昏迷或尿潴留病人可导尿留取标本,男病人也可用塑料袋固定接尿。女病人在月经期不宜留取尿标本。
(二)尿培养标本
1.目的 取未被污染的尿液作细菌培养及计数,以明确诊断。
2.用物 无菌试管、试管夹、酒精灯及火柴,必要时备外阴冲洗及导尿物一套(见导尿术)。
3.操作方法 女病人留中段尿法:
病人取坐位或卧位,垫便盆,按导尿法清洁、消毒外阴部(轻病人自行清洗),再用0.1%新洁尔灭溶液消毒尿道口,嘱病人自行排尿,护士用试管夹夹住无菌试管,弃去前段尿液,留取中段尿约5ml,留尿前后均应将无菌试管口及棉塞在酒精灯焰上消毒,盖紧棉塞,防止污染。必要时可用导尿法留取。操作完毕,协助病人穿裤,整理用物,及时送验。
男病人留中段尿法基本同女病人法,将尿道口周围彻底消毒后留取即可。
4.注意事项
(1)严格无菌操作,以免污染尿液。采集中段尿时,必须在膀胱充盈情况下进行。
(2)尿内勿混入消毒液,以免产生抑菌作用而影响检验结果。
(三)留12小时或24小时尿标本
1.目的 检查一日尿量及尿内容物,如钠、钾、氯、17-羟类固醇、17-酮类固醇、肌肝、肌酸、尿糖、尿蛋白定量及浓缩查结核杆菌等。
2.用物 备清洁带盖的大口容器(容量为3000-5000ml)。
3.操作方法
(1)备好容器,贴上标签,注明采集的起止时间,并向病人说明留尿的目的、方法。以取得合作。
(2)嘱病人于清晨7时排空膀胱,弃去尿液,记录开始留尿时间,病人解第一次尿时即应加防腐剂(表17-6),使之与尿液混合,防止尿变质;至次晨7时排尽最后一次尿,即24小时尿液全部送验。留12小时尿标本,应从19点开始至次晨7点止。
(3)如作尿肌酸、肌酐、17-羟类固醇、17-酮类固醇、钾、钠、尿糖定量检查,可测定24小时尿总量,记录于检验单上,取出100ml尿液送验,其余弃去。也可将24小时的尿标本分段留取,即:7-11时为第1次,11时-17时为第2次,17-21时为第3次,21时至次晨7时为第4次,作为4段尿糖定性检查。如浓缩检查结核杆菌或作尿蛋白定量检查,则将24小时全部尿液送验。
(四)测定肾功能的尿标本采集法
1.24小时尿比重测定法(浓缩稀释试验法)。
(1)目的 测量肾功能 ,其中主要了解肾小管的调节功能。
(2)用物 6个标本瓶和留12小时尿容器。
(3)操作方法 备好容器贴标签,注明采集时间,在病人在正常饮食情况下进行,上午8时排尿弃去,此后每隔2小时的尿液,分别留于清洁瓶内,共留取6次尿标本送验。20时至次日8时,将尿留入一个标本瓶中送验。
参考值:在正常情况下夜尿量应少于日尿量,夜尿量一般在250-500ml ,最多不超过700ml,如超过此数量,比重固定在1.010 左右,表示肾功能不全。日尿量标本中,其中最高的一次比重应在1.018以上,最低的一次应在1.000 ~1.009.
表17-6常用的防腐剂
剂名 | 机理 | 应用举例 |
40% 甲醛 | 固定尿中有机成分,抑制细菌生长。 | 爱迪氏计数100ml尿中加0.5ml |
甲苯 | 保持尿液的化学成分不变,形成一薄膜覆盖尿液表面,防止细菌污染。 | 尿蛋白定量、尿糖定性加入数滴,测定尿中钾、钠、氯、肌、酐,肌酸等须加入10ml. |
浓 盐 酸 | 使尿液在酸性环境中,能防止尿中激素被氧化。 | 17-羟类固醇与17-酮类固醇等检查24小时尿中加5-10ml |
2.酚红排泄试验
(1)目的 测定肾小管排泄功能。
(2)用物 静脉穿刺用物1套,1ml注射器,针头,0.6%酚红1支,标本瓶4个。
(3)操作方法
①备齐用物,贴好标本瓶标签,注明标本采集时间,并向病人说明采取标本的目的及方法,试验前2小时至试验完毕禁吸烟、饮茶。
②嘱病人晨起禁食,排尿弃去后,饮水300-500ml,促进排尿。
③静脉注射酚红溶液6mg,剂量必须准确,并记录注射时间。
④注射后15分钟、30分钟、60分钟及120分钟各收集全尿1次,待全部标本采集后,一同送验。
如采用肌内注射法,则于注射后70分钟、120分钟留全部尿一次。
参考值:排泄率分别为15分钟25%-50%,30分钟15%-25%,60分钟10%-15%,120分钟5%-10%。2小时排泄总量>55%。
3.内生肌酐清除率试验
(1)目的 测量肾小球滤过率。
(2)用物 静脉穿刺盘1套,抗凝标本瓶2个,尿标本瓶1个。
(3)操作方法
①患者进低蛋白饮食3天,试验当天勿饮茶或咖啡,避免剧烈运动,清晨嘱病人饮水300ml后排空膀胱,此后准确收集5小时的尿液,并抽血3ml送验。
②测定尿及血中肌酐含量,算出每分钟尿量,再按下式计算内生肌酐清除值。
内生肌酐清除值(ml/min)=尿肌酐浓度(mg/日)×尿量 (ml/min)/血肌酐浓度(ml/日)。
参考值:70-125ml/min.
4.尿素澄清试验
(1)目的 了解肾脏排泄功能。
(2)用物 静脉穿刺盘1套,抗凝标本瓶1个,尿标本瓶2个。
(3)操作方法
①试验前一日及试验当日,病人进正常饮食,但不可饮茶或咖啡,也不宜作剧烈运动。
②当日早餐后(或饮水300ml,半小时后),排尽尿液弃去,此后准确收集第1小时和第2小时的全部尿液,切勿丢失。
③在2小时之间抽血2ml送验。
④分别测定血液及2次尿液中的尿素含量,并算出每分钟尿量。
参考值:最大清除值60-90ml/分,标准清除值41-68ml/分,清除率65%-125%。
如两次尿标本计算的清除率相差超过30%,应重留标本测定。
(五)葡萄糖耐量试验
1.目的 测定胰腺功能。正常人服一定量葡www.med126.com/zhuyuan/萄糖后,血糖随即升高,待一段时间后,血糖恢复到空腹血糖水平。如给一定量葡萄糖负荷后,观察血糖升高、恢复的水平和速度,可间接了解胰岛β细胞的储备功能。
2.用物 抗凝血标本瓶5个,尿标本瓶5个,静脉穿刺盘1套。
3.操作方法
(1)试验前三天,每日碳水化合物进量不少于300g..
(2)试验前一天晚餐后禁食至试验完毕。
(3)试验日清晨抽血2ml检查血糖,并留尿一次。
(4)将100g葡萄糖溶于300ml开水中,请病人服下,服后半小时、1小时、2小时、3小时、各收集尿标本查尿糖,并分别抽血查血糖,应将标本迅速送验。
参考值:空腹血糖3.9 ~6.2mmol/L,30min<9.5mmol/L, 60min/9.0mmol/L , 2小时≤6.7mmol/L,3小时后恢复至正常水平,每次尿糖均为阴性。
(一)粪便常规标本
1.目的 检查粪便颜色、性状、有无脓血、寄生虫卵等。
2.用物 蜡纸盒、竹签。
3.操作方法
(1)将化验单副联贴于蜡纸盒上,注明科室、床号、病人姓名等。
(2)交待病人清晨留取标本,用竹签取5g大便(似蚕豆大小),放入蜡纸盒中送验 。重病人由护士协助留取,如为腹泻病人应取脓、血、粘液等异常部分,如为水样便,可盛于大口玻璃瓶中送验。
(二)粪便培养标本
1.目的 取粪便标本作细菌培养。
2.用物 便盆 清洁蜡纸盒或试管,棉签或肠拭子。
3.操作方法 嘱病人排便于便盆内,用消毒棉签采取粪便的异常部分于蜡纸盒内或试管内,也可用肠拭子蘸等渗盐水,由肛门插入直肠4-5cm处,轻轻转动,取出粪便少许,放入无菌培养试管中,盖好送验。用肠拭子直接采取标本进行培养,可提高阳性率。
(三)检查寄生虫及虫卵标本
1.目的 检查寄生虫数、浓缩集卵、孵化血吸虫毛蚴。
2. 用物 带盖的便器,蜡纸盒,竹签。
3.操作方法
www.med126.com(1)检查寄生虫卵的粪便标本:应从粪便几个不同的部分采集5-10g。如查血吸虫卵,则应采集带血及粘液部分送验;查蛲虫卵,应在23点左右,病人感觉肛门周围发痒时,用无菌棉签蘸生理盐水,自肛门周围皱壁处拭取,然后插入试管内,塞好管口送验。
(2)检查阿米巴原虫的粪便标本;收集标本前,应先将便器加温后再排便,便后连同便盆立即送验(因阿米巴原虫排出体外后因温度突然改变失去活力,不易查到)。
(3)查寄生虫体:病人服驱虫药后,应将大便排于清洁便盆中留取全份粪便,检查蛔虫,钩虫、蛲虫的数目。如驱绦虫,应嘱病人勿用手纸去拉已排出肛门外的虫体,以免拉断虫头不能排出。如第一次大便未见虫头,应告诉病人再留第二次大便送验,只有头节排出才表示驱虫成功。
(4)孵化血吸虫毛蚴的标本;留取粪便50g(鸭蛋大小),必要时留取24小时大便,要及时送验。
(四)隐血标本
1.目的 检查粪便内肉眼不能察见的微量血液。
2. 用物 蜡纸盒、竹签或特制标本盒。
3.操作方法 嘱病人在检查前三天内禁食肉类、肝类、血类、叶绿素类饮食及含铁剂药物,避免出现假阳性,于第4天留取5g 粪便,置于蜡纸盒内, 及时送验。
(一)痰常规标本
1.目的 检查痰液中的细菌、寄生虫卵和癌细胞。
2.用物 蜡纸盒或广口瓶。
3.操作方法 嘱病人晨起用清水漱口清洁口腔,然后用力咳出气管深处的痰液,盛于蜡纸盒或广口瓶内,如查癌细胞,瓶内应放10%甲醛溶液或95%酒精溶液固定后送验。
(二)痰培养标本
1.目的 检查痰液中的致病菌。
2.用物 朵贝氏液,无菌培养皿或瓶。
3.操作方法 清晨痰量多,含菌量亦大,嘱病人先用朵贝氏液,再用清水漱口,以除去口腔中细菌,深吸气后用力咳出1-2口痰于培养皿或瓶中,及时送验。
(三)24小时痰标本
1.目的 检查一日痰量,观察痰的性状、颜色、量、气味及内容物(虫卵计数)或浓缩查结核菌。
2.用物 痰杯或广口无色玻璃瓶(容量500ml)。
3.操作方法
(1)容器上的贴好标签,注明起止时间,并作好交接班。
(2)嘱病人将晨7时至次日7时的痰液全部留在容器中送验,不可将漱口液、唾液等混入。
(一)目的 检查致病菌,协助诊断。
(二)用物
无菌拭子试管,酒精灯,火柴,无菌生理盐水,压舌板。
(三)操作方法
1.咽拭子培养 备齐用物,贴好标签,向病人说明目的以取得合作。点燃酒精灯,将拭子取出蘸无菌生理盐水(必要时以压舌板轻压舌部),嘱病人发“啊”音,以轻快的动作,迅速擦拭两侧腭弓及咽、扁桃体的分泌物后,速将试管口在酒精灯火焰上消毒,将拭子插入试管中塞紧,并立即送验。取霉菌培养标本,须在口腔溃疡面上采取分泌物。
2.伤口分泌物标本 用拭子擦拭伤口分泌物后,速将试管口于酒精灯火焰上消毒,插入拭子塞紧送验。
复习思考题
1.集检验标本有何意义?
2.采集标本的原则是什么?
3.采集全血、血清、血培养标本应各备何种盛血容器?为什么?采集中应注意的事项?
4.如何采集尿常规、12小时24小时的尿标本?
5.如何采集痰标本?
6.怎样采集粪便常规标本、隐血标本?
7.留取寄生虫及虫卵标本时应注意什么?
8.常用的血液抗凝剂有哪些?
9.留取尿标本做爱迪氏计数及17-酮类固醇检查时各应选择何种防腐剂?