四、除去注射剂中热原的方法:
1、除去药液或溶剂中热原的方法
①吸附法:
常选用优质活性炭(针剂用),常用量为0.1%~0.2%(g/ml)。热原多时,用量可增加至0.5%(g/ml),加热至60℃~80℃,15~30分钟,吸附处理,此外还有脱色、助滤作用;还可吸附药物成分(生物碱、黄酮类等),注意使用量。
也可与硅藻土配合应用,除去热原效果好。
②离子交换法:
由于热原这类大分子上含磷酸根与羧酸根,往往带有负电荷,故易被强碱性阴离子交换树脂所交换,从而除去热原。
③凝胶过滤法:
分子筛滤过法,凝胶物质为滤过介质。适用于药物分子量(生化制剂)明显大于热原分子。
④超滤法:
用特制的微孔滤膜(孔径一般为5~50nm)可除去热原,依靠压力与流速,滤过速度快。要正确掌握超滤操作方法,方能有效。
⑤反渗透法:
三醋酸纤维素膜或聚酰胺膜出去热原。
2、除去容器、用具上热原的方法
①高温法:
凡能耐受高温处理的容器、用具,如注射用玻璃针筒及其他玻璃容器,在洗净后于250℃加热半小时以上,可有效地破坏热原。 医.学.全.在.线www.med126.com
②酸碱处理法:
热原可被强酸或强碱所破坏,所以玻璃、瓷制及塑料可用酸液或碱液处理,以重铬酸钾-硫酸清洁液浸泡更为方便。
此外,加强预防。
五、热原的检查方法:
1、家兔致热试验法:药典法。
将一定量的供试品,静脉注入家兔体内,在规定时间内,观察家兔体温升高的情况,以判定供试品中所含热原的限度是否符合规定的方法。具体工作、环境、家兔的条件及操作方法,应严格按《中国药典》1995年版热原检查项下规定执行。
2、鲎试验法:
本法利用一种低温海洋动物-鲎的血细胞(变形细胞)溶解物(又称鲎试剂)与微量细菌内毒素或热原发生凝胶反应,从而检测微量的内毒素或热原的一种实验技术。该法实质上是一种酶反应,因为鲎血细胞中含有一种高分子量的凝固酶原和一种可凝固蛋白原,前者经内毒素(即热原)激活转化成具有活性的凝固酶,通过酶解作用,使凝固蛋白原转变成凝固蛋白,凝固蛋白又经过交联酶的作用相互聚合形成凝胶。
胶凝的速度与内毒素浓度成正比。已知反应的最适温度为36℃~38℃,最适pH值为6~7.5。
本法虽具有操作简便、迅速、灵敏度高(比兔法高10倍左右)等优点,但若操作不当,会出现一定数量的假阳性反应,且尚未法定,一般多作预测和筛选试验,对革兰阴性杆菌以外的内毒素不敏感。