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硫酸鱼精蛋白生物检定法,药物分析辅导西药分析
来源:医学全在线 更新:2007/5/17 字体:
本法系比较肝素标准品(S)与供试品(T)延长新鲜血或猪、兔血浆凝结时间的程度,以测定供试品的效价。
  肝素标准品溶液的配制
  精密称取肝素标准品适量,按标示效价加0.9%氯化钠溶 液溶解使成几种不同浓度的溶液,相邻两种浓度每1ml中所含肝素单位数相差应相等,且不超过5个单位,一般可配成每1ml中含85、90、95、100、105、110、115、120、125等单位的溶液。
  供试品溶液的配制
  供试品如为粉末,精密称取适量,按干燥品计算,加0.9%氯化钠溶液溶解使成每1ml中含1mg的溶液。供试品如为注射液,则按标示量加0.9%氯化钠溶液稀释至同样浓度。
  血浆的制备
  按肝素生物检定法中血浆制备法制备(附录Ⅻ D)。
  检定法医学全在.线网站www.med126.com
  取管径均匀(0.8×3.8cm)清洁干燥的小试管8支,第1管和第8管为空白对照管,加入0.9%氯化钠溶液0.2ml,第2~7管为供试品管,每管均加入供试品溶液0.1ml,再每管分别加入上述一种浓度的肝素标准品稀释液0.1ml,立即混匀。取刚抽出的兔血适量,分别加入上述8支试管内,每管 0.8ml,立即混匀,避免产生气泡,并开始计算时间,将小试管置37±0.5℃恒温水浴中,从采动物血时起至小试管放入恒温水浴的时间不得超过2分钟;如用血浆,则分别于上述各管中加入0.7ml的血浆,置37±0.5℃恒温水浴中预热5~10分钟,每管分别加入1%氯化钙溶液0.1ml,立即混匀,避免产生气泡,并开始计算时间。观察并记录各管凝结时间。
  结果判断
  两支对照管的凝结时间相差不得超过1.35倍。在供试品管的凝结时间不超过两支对照管平均凝结时间150%的各管中,以肝素浓度最高的一管作为终点管。
  同样重复5次,5次试验测得终点管的肝素浓度,相差不得大于10个单位。5次结果的平均值,即为硫酸鱼精蛋白供试品(干燥品)1mg中和肝素的单位数。
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