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中药化学成分预试验大全—氨基酸、多肽、蛋白质
来源:本站原创 更新:2011/4/19 字体:

氨基酸、多肽、蛋白质

  (1)加热沉淀试验:加热煮沸 →混浊或沉淀 (蛋白质)+5%H2SO4(不加热)→混浊或沉淀

  (2)双缩脲反应:+40%NaOH,1%CuSO4 →紫色、红色或紫红色(多肽、蛋白质)

  (3)茚三酮反应:+0.2%茚三酮试液 →蓝或蓝紫色(氨基酸、多肽、蛋白质)

  (4)吲哚醌反应:+吲哚醌试液 →各种颜色(氨基酸) 医.学 全在.线提供www.med126.com

  (5)Millon反应:+Hg,H2NO2 →红色(蛋白质分子中有氨酸组成)

  (6)Hopkins-Cole反应:+乙醛酸,浓硫酸 →各色(蛋白质分子中有色氨酸组成)

  (7)氨基酸的薄层层析检查:吸附剂——硅胶G

  展开剂—— n-BuOH,n-BuOH:HAc:H2O

  显色剂——0.25%茚三酮试液 →紫红色斑点

  (1)加热或矿酸试验:取检品的水溶液1ml于试管中,加热至沸或加5%盐酸,如发生混浊或有沉淀示含有水溶性蛋白质。 医学 全在.线提供www.med126.com

  (2)缩二脲试验:取检品的水溶液1ml,加10%氧化钠溶液2滴,充分摇匀,逐渐加入硫酸铜试液,随加摇匀,注意观察,如呈现紫色或紫红色示可能含有蛋白质和氨基酸。

  凡蛋白质结构中含有两个或两个以上肽键(-CONH-)者均有此反应,能在碱性溶液中与Cu2+生成络合物,呈现一系列的颜色反应,二肽呈蓝色,三肽呈紫色,加肽以上呈红色,肽键越多颜色越红。

  (3)茚三酮试验,取检品的水溶液1ml,加入茚三酮试液2-3滴,加热煮沸4-5分钟,待其冷却,呈现红色棕色或蓝紫色(蛋白质、胨类、肽类及氨基酸)。

  氨基酸与茚三酮的水合作物作用,氨其酸氧化成醛、氨和二氧化碳,而茚三酮被还原成仲醇,与所后成的氨及另一分子茚三酮缩合生成有蓝紫色的化合物。

  【注】

  ①茚三酮试剂主要是多肽和氨基酸的显色剂,医学.全在.线www.med126.com反应在1小时内稳定。试剂溶液pH值以5-7为宜,必要时可加吡啶数滴或醋酸钠调整。

  ②此反应非常灵敏,但有个别氨基酸不能呈紫色,而呈黄色,如脯氨酸。

  (4)氨基酸薄层层析检出反应:

  ①吸附剂:硅胶G。

  ②展开剂:(1)正丁醇:水(1:1)(2)正丁醇:醋酸:水(4:1:5)

  ③显色剂:0.5%茚三酮丙酮溶液,喷雾后于1100烘箱放置5分钟,显蓝紫允或紫色。

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