蛋种鸡场鸡白痢检测方法与净化程序
-----
鸡白痢是由鸡白痢沙门氏菌（Salmonella pullorum, SP)引起的细菌性疾病，本病既可水平传播，又可通过种蛋垂直传染，是危害养鸡业最严重的疾病之一，本文就大型蛋种鸡场对此病实施的检测方法和净化措施进行了综述。1 鸡白痢检测方法 在规模化蛋种鸡场中最常选用的是平板凝集试验来进行大规模鸡群的检测，以实施净化。1.1 全血平板凝集试验 操作方法为用微量移液器吸取30μL鸡白痢抗原，滴在洁净的普通玻璃板或陶瓷板上，用注射器针头刺破被检鸡只翅膀内侧的静脉血管，每只鸡更换1个针头，用微量移液器吸取30μL流出的血液，与抗原充分混合，随即涂展成直径为1.5～2cm的圆形混合液，摇晃玻板，并随时观察凝集反应。1.2 血清平板凝集试验 首先采集待检鸡只全血样本，将血样置于塑料离心管内，并记录对应鸡只编号，待血清自然析出后，吸取血清，进行血清平板凝集试验。1.3 结果判断 检测前，需进行抗原对照试验，取30μL抗原，与等体积标准强阳性血清、弱阳性血清、阴性血清按等体积混合，在2～3分钟内，强阳性血清出现100%凝集（++++)；弱阳性血清出现50%（++)；阴性血清不凝集（-)，方可进行检测。 抗原与待检样品混合后2～3分钟，判定结果，有50%（++)以上凝集为阳性，不发生凝集为阴性。1.4 注意事项 全血平板凝集试验，操作简便、反应速度快，可在现场进行，在生产实践中应用最为广泛。但由于受鸡舍内环境、光线、温度等条件影响，致使检测结果存在一定假阳性的比例。此外，该方法灵敏度有一定的局限性，只能检测到抗体滴度较高的带菌鸡，因此常存在漏检现象。而血清中抗体含量较高，因此血清平板凝集较全血平板凝集特异性强、敏感性高、检出阳性率高。但操作相对复杂，且需要对待检鸡只进行编号，因此，该方法适用于核心鸡群净化检疫。 检测用抗原应置于2-8℃冷暗处保存，回复到室温后方可检测，使用过程中要保持抗原处于悬浮液状态，检测需在20～30℃的环境中进行。抗原与待检血清或全血需等体积混合，反应时间控制在2～3分钟内，不得任意延长或缩短。待检血清或全血不应有细菌污染。玻板必须光滑、洗净，否则影响实验结果。2 净化程序 通过检测淘汰阳性鸡只是净化工作的核心，因此，科学、严格的检测程序是实现净化的重要保障。根据白痢杆菌阳性鸡血清抗体消长规律，种鸡的首次最适检疫时间为120～140日龄，即开产前。此时种鸡处于性成熟阶段，血检时反应速度快，检出率高，并且在生产种蛋前进行检测，对确保种蛋无白痢杆菌感染十分重要。然而，根据鸡白痢的血清学特点，仅靠1次检疫是远远达不到净化效果的，必须通过两次，甚至多次检测将处于不同感染时期的带菌鸡彻底检出并淘汰。2.1 曾祖代鸡群净化程序 在产蛋率达10%、继代前2次检疫。采用血清平板凝集的方法，在鸡群产蛋率达10%时首次普检。如果有阳性鸡检出，则在1个月后进行第二次普检，直至无阳性鸡检出；如果无阳性鸡检出，则以后每月公鸡普测，母鸡每季度抽测一次，每次抽测5～10%，超标时普检。继代前进行第二次普检。每次检出的阳性鸡必须立即淘汰，并对环境、笼具等彻底消毒。2.2 祖代鸡群净化程序 鸡群产蛋率达10%时普检。如果鸡群阳性率超标（1‰)，每月普检一次，直至达标后停止普检；如果首次检测时阳性率不超标，以后每月公鸡普测，母鸡每季度抽测1次，每次抽测5～10%，超标时普检。每次检出的阳性鸡必须立即淘汰，并对环境、笼具等彻底消毒。2.3 父母代鸡群净化程序 鸡群产蛋率达10%时普检。如果鸡群阳性率超标（2‰)，35周龄第二次普检。如果首次检测时阳性率低于以上标准，以后每月公鸡普测，母鸡每季度抽测1次，每次抽测5～10%，超标时普检。每次检出的阳性鸡必须立即淘汰，并对环境、笼具等彻底消毒。