猪支原体性肺炎是对养猪业造成重大经济损失，最常发生、流行最广、是非常难治愈的重要疫病之一。是由猪肺炎支原体引发的一种慢性肺炎，也叫做猪地方流行性肺炎。但近年来由于经常圆环病毒等其它病原混合感染，给饲主造成重大的经济损失。因此，饲养http://www.med126.com/shouyi/yu/jiage/过程中要对猪支原体肺炎正确诊断、检测，及早防治是非常重要的。目前用于MPS的血清学试验有放射免疫扩散测定、补体结合试验、间接血凝试验、凝集试验以及酶联免疫吸附试验等等，其中用间接血凝试验、补体结合试验和酶联免疫吸附试验更为理想。

血清学抗体检测技术诊猪支原体肺炎

1、检测猪支原体肺炎间接血凝试验

间接血凝试验(IHA)具有一定的特异性和敏感性，是诊断猪支原体肺炎的常用方法之一。Dowdle等首先用IHA检测Mhp抗体，但被感染猪的血清能使绵羊红细胞自然溶血。Lam等用猪红细胞代替绵羊红细胞，固然其效价比用绵羊红细胞低，但在试验中不易发生溶血现象。由于血清中含有特异吸附因子易溶血，制备的红细胞存在个体差异不易标准化，其试验也不易操纵，使得IHA在临床应用中受到了一定的限制。

2、检测猪支原体肺炎补体结合试验

补体结合试验(CFT)也是检测猪血清中Mhp抗体的有效试验之一，包括微管补体结合试验和微量修正补体结合试验。补体结合试验在实验接种猪和自然感染猪中，CFT阳性率与猪肺部病变有较好的相关性，但仍存在着很高的假阳性和假阴性。Lloyd等以为，假阴性是由于循环抗原的影响，而假阳性是由于感染了其他支原体出现交叉反应或是由于没产生或发现病变。CFF不能确定4―9周龄猪的感染状况。CFT在敏感性和特异性方面存在一定的局限性，但假如综合运用临诊和病理显微检查，CFT还是确定Mhp感染状况的有效手段之一。

3、检测猪支原体肺炎酶联免疫吸附试验

酶联免疫吸附试验是目前国内外最常用于诊断Mhp的方法之一，具有能进行定量分析、敏感性高、特异性强的特点。Bmggmann等首次报道以SDS提取物作抗原，用间接ELISA检测Mhp抗体的敏感性高，但易与絮状支原体和猪鼻支原体发生非特异性交叉反应。Nicolet等改用Tween20提取物作抗原，用间接ELISA检测Mhp抗体，结果比用支原体全菌和SDS溶解物作抗原有更高的特异性，但与絮状支原体也存在部分交叉反应。Bereiter等用改进的Tween20 ELISA降低了因絮状支原体感染引起的交叉反应。Fut0克隆了Mhp的46ku表面抗原(p46)基因，诱变后在E coli中表达，用提纯的重组P46蛋白作抗原用于ELISA诊断，结果发现与其他猪支原体无交叉反应。Feld等建立了一种单克隆抗体阻断ELISA，此法可从单个抗原决定簇上检测Mhp抗体，而且不需完全纯化抗原。随后，Potier等建立了一种用Mhp特有的40ku膜蛋白作抗原的单克隆抗体阻断ELISA，用此法检测接种了猪鼻支原体和絮状支原体的SPF猪和感染Mhp猪的血清，发现Mhp与絮状支原体和猪鼻支原体无交叉反应。Eun Jin

Jang等(2007)将黏附因子P97在E. coli中表达，使猪肺炎支原体裂解成6个片断，采用其中的50 KDa的蛋白做为抗原做ELISA，结果发现特异性很强。在国内，刘茂军等(2007)选用猪肺炎支原体Mhp J株全菌膜蛋白作为包被抗原，建立检测猪肺炎支原体抗体的间接ELISA检测方法，结果显示此方法灵敏度很高。

4、检测猪支原体肺炎表面细胞质基因组共振实验

Kim TJ(2006)利用P97粘附因子中的分子量为30 KDa的蛋白为抗原建立了检测猪肺炎支原体抗体滴度的表面细胞质基因组共振实验。该实验和传统ELISA方法同时检测了来自6个猪场的70份血清，结果显示表面细胞质基因组共振实验具有很高的特异性和敏感性，而且两种方法有正相关性。

通过上述：

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