猪场人工授精全流程
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准备工作 1、采精员一手带双层手套,另一手持37℃保温杯(内装1次性食品袋)用于收集精液; 2、饲养员将待采精的公猪赶至采精栏,用0.1%高锰酸(如果不好掌握浓度,可以用
聚维酮碘溶液)清洗其腹部和包皮,再用温水(夏天用自来水)清洗干净,避免药物残留对精子的伤害; 3、采精员挤出公猪包皮积尿,按摩公猪包皮部,刺激其爬跨假猪台; 4、公猪爬跨假猪台并逐步伸出阴茎,脱去外层手套,将公猪阴茎
龟头导入空拳; 5、用手(大拇指与龟头相反方向)紧握伸出的公猪阴茎螺旋状龟头,顺其向前冲力将阴茎的“s’’状弯曲拉直,握紧阴茎龟头防止其旋转,公猪即可射精; 6、用四层沙布过滤(二收集浓份精液于保温杯内的一次性食品袋内,最初射出的少量精液含精子很少,可以不必接取,有些公猪分2-3个阶段将浓份精液射出,直到公猪射精完毕,射精过程历时5-7分钟; 7、采精员应注意安全,一旦公猪出现攻击行为,采精员应立刻逃至安全角; 8、下班之前彻底清洗采精栏; 9、采精期间不准殴打公猪,防止出现性抑制; 10、采精频率:成年公猪每周2次,青年公猪(1岁左右)每周1次。最好固定每头公猪的采精频率; 11、公猪采精调教:①后备公猪7月龄开始进行采精调教;②每次调教时间不超过15分钟;③一旦采精获得成功,分别在第2、3天再采精1次,进行巩固掌握该技术;④采精调教可采用发情母猪诱导、观摩有经验公猪采精、以发情母猪分泌物刺激等方法;⑤调教公猪要有耐心,不准打骂公猪;⑥注意公猪和调教人员的安全。 稀释液配制操作规程 1、配制稀释液的药品要求选用分析纯试剂,对含有结晶水的试剂要按摩尔浓度进行换算(如含水
葡萄糖和无水
葡萄糖); 2、按稀释液配方,用称量纸、电子天平准确称量药品; 3、按1000ml、2000ml剂量称量稀释粉,置于密封袋中; 4、使用前将称量好的稀释粉溶于定量的双蒸水中,可用磁力搅拌器助其溶解; 5、用滤纸过滤,以尽可能除去杂质; 6、用1ml稀盐酸或1ml氢氧化钠调整稀释液的ph值为7.2(6.8-7.4)左右,渗透压为330mosm;稀释液配好,应及时贴上标签,标明品名、配制日期和时间、经手人等; 7、要认真检查已配制好的稀释液成品,发现问题及时纠正; 8、液态状稀释液冰箱4℃保存,不超过24小时,超过有效贮存期的变质稀释液应废弃。 精液质量的检查操作规程 1、精液量:以电子天平称量精液,按每克1毫升计,避免以量筒等转移精液盛放容器的方法测量精液体积; 2、颜色:正常的精液是乳白色或浅灰白,精子密度越高,色泽愈浓,其透明度愈低。如带有绿色或黄色是混有脓液或尿液,若带有淡红色或红褐色是含有血液。这样的精液应舍弃不用,会同兽医寻找原因; 3、气味:猪精液略带腥味,如有异常气味,应废弃; 4、ph值(酸碱度):以ph计测量(ph计使用见说明书); 5、精子活率检查:活率是指呈直线运动的精子百分率,在显微镜下观察精子活率,一般按0.1-1.0 的十级评分法进行,鲜精活率要求不低于0.7; 6、精子密度:指每毫升精液中所含的精子数,是确定稀释倍数的重要指针。要求用血细胞计数板进行计数或精液密度仪测定。血细胞计数板计数方法:①以微量加样品取具有代表性原精液100μl,3%nac l900μl,混匀,使之稀释10倍;②在血细胞计数室上放一盖玻片,取1滴上述精液放入计数板的槽中,靠虹吸将精液吸入计数室内;③在高倍镜下计数5个中方格内的精子总数,将该数乘以50万,即得原精液每毫升的精子数(即精液密度)。精液密度仪使用见其说明书; 7、精子畸形率:畸形率是指异常精子的百分率,一般要求畸形率不超过18%,其测定可用普通显微镜,但需伊红或姬姆沙染色,相差显微镜可直接观察活精子的畸形率,公猪使用过频或高温环境会出现精子尾部带有原生质滴的畸形精子;畸形精子种类很多,如:巨型精子、短小精子、双头或双尾精子,顶体膨胀或脱落、精子头部残缺或与尾部分离、尾部变曲。要求每头公猪每两周检查一次精子畸形率; 8、按要求做好精液质量检查登记表; 9、实事求是地填写种公猪健康状况登记表,从而真实地反应种公猪健康状况。 精液的稀释操作规程 1、精液采集后应尽快稀释,原精贮存不超过30分钟; 2、未经质量检查或检查不合格(活力0.7以下)的精液不能稀释; 3、稀释液与精液要求等温稀释,两者温差不超过1℃,即稀释液应加热至33℃-37℃,以精液温度为标准,来调节稀释液的温度,绝不能反过来操作; 4、稀释时,将稀释液沿盛精液的杯(瓶)壁缓慢加入到精液中,然后轻轻摇动或用消毒玻璃棒搅拌,使之混合均匀; 5、如作高倍稀释时,应进行低倍稀释(1:1-2),稍待片刻后再将余下的稀释液沿壁缓慢加入,以防造成“稀释打击”; 6、稀释倍数的确定:活率≥0.7的精液,一般按每个输精剂量含40亿个总精子,输精量为80-90ml确定稀释倍数,例如:某头公猪一次采精量是200ml ,活力为0.8,密度为2亿/ml,要求每个输精剂量是含40亿精子,输精量为80ml,则总精子数为200ml×2亿/ml=400亿,输精头份为400亿÷40亿=10份,加入稀释液的量为10×80ml-200ml=600ml; 7、稀释后要求静置片刻再作精子活力检查,如果稀释前后活力一样,即可进行分装与保存,如果活力下降,说明稀释液的配制或稀释操作有问题,不宜使用,并应查明原因加以改进; 8、不准随便更改各种稀释液配方的成分及其相互比例,也不准几种不同配方稀释液随意混合使用; 9、稀释液的配方见附表。 精液的常温保存的操作规程 1、精液稀释后,检查精液活率,若无明显下降,按每头份80-90 ml分装; 2、瓶上加盖密封,并在输精瓶上写清楚公猪的品种、耳号,采精日期(月、日、时); 3、置22℃-25℃的室温1小时后(或用几层毛巾包被好后)直接放置17℃冰箱中; 4、保存过程中要求每12小时将精液混匀一次,防止精子沉淀而引起死亡; 5、每天检查精液保存箱温度并进行记录,若出现停电应全面检查贮存的精液质量; 6、尽量减少保存精液保存箱关开次数,以免造成对精子的打击而死亡。 发情鉴定技术的操作规程 1、母猪发情周期平均21天(19--23天),大多数经产母猪一般在仔猪断奶后的一周内(3--7天),可再次发情排卵,配种受胎; 2、母猪发情周期可分为发情前期、发情期、发情后期和间情期,母猪只有在发情才允许公猪爬跨或称之为站立反应,此性行为表现可作为母猪适时输精的指标; 3、各期特征,略述如下:①发情前期:母猪举动不安,外阴肿胀,并由淡黄色变为红色这种变化在后备母猪较为明显;阴道有粘液分泌,其粘度渐渐增加。在此期母猪不允许人骑在背上,平均可有2.7天,不宜输精配种。②发情期:平均约2.5天,特征为母猪阴部肿胀及红色开始减退,分泌物也变浓厚,粘度增加。此时母猪允许压背而不动,压背时,母猪双耳竖起向后,后肢紧绷。③发情后期:1-2天,发情母猪的阴部完全回复正常,不允许公猪爬跨;④间情期:13-14天,完全恢复正常状态; 4、发情鉴定:每日最少要做两次试情(每天上午6:30-8:30和下午16:00-17:30进行发情检查),即在安静的环境下,有公猪在旁时,压背,以观察其站立反应。试情公猪一般选用善于交谈、唾液分泌旺盛、行动缓慢的老公猪; 5、作好发情检查的完整记录:包括发情母猪耳号、胎次、发情时间、外阴部变化、压背反应等,尤其是后备母猪的记录。 输精操作规程 1、输精次数:①第1次自然交配、第2、3次人工授精;②2次人工授精;③3次人工授精; 2、输精时间:①断奶后3-6天发情的经产母猪,发情出现站立反应后6-12小时进行第1次输精配种;②后备母猪和断奶后7天以上发情的经产母猪,发情出现站立反应,就进行配种(输精); 3、精液检查:从17℃保存箱取出的精液,轻轻摇匀,用已灭菌的滴管取1滴放于预热的载玻片,置于37℃的恒温板上片刻,用显微镜检查活力,精液活力≥0.7,才可进行输精; 4、将试情公猪赶至待配母猪栏之前,使母猪在输精时与公猪口鼻部接触; 5、输精人员消毒清洁双手; 6、用0.1%
高锰酸钾水溶液清洁母猪外阴、尾根及臀部周围,再用温水浸湿毛巾,擦干外阴部; 7、从密封袋中取出没受任何污染的一次性输精管(手不应接触输精管前2/3部分),在其前端涂上精液作为润滑液; 8、将输精管45度角向上插入母猪生殖道内,输精管进入3-4cm之后,顺时针旋转,当感觉有阻力时,继续缓慢旋转同时前后移动,直到感觉输精管前端被锁定(轻轻回拉不动),并且确认真正被子宫颈锁定; 9、从精液贮存箱取出质量合格的精液,确认公猪品种、耳号; 10、缓慢颠倒摇均精液,用剪刀剪去瓶嘴,接到输精管上,开始进行输精; 11、用针头在输精瓶底部扎一个小孔,抚摸母猪的乳房或外阴、压背刺激母猪,使其子宫收缩产生负压,将精液吸纳;输精时勿将精液挤入母猪生殖道内,防止精液倒流; 12、控制输精瓶的高低来调节输精时间,输精时间要求3-5分钟,输完一头母猪后,应在防止空气进入母猪生殖道的情况下,把输精管后端一小段折起,放在输精瓶中,使其滞留在生殖道内3-5分钟,让输精管慢慢滑落; 13、从17℃精液保存箱中取出的精液,无需升温至37℃,摇匀后可直接输精,但检查精液活力需将玻片预热至37℃; 14、经产母猪用一次性海绵头输精管,输精前检查海绵头是否松动;后备母猪用一次性螺旋头输精管。为防止子宫炎发生,每头母猪每次输精都应使用一条新的输精管; 15、每头母猪在一个发情期内要求至少输精两次,最好三次,两次输精时间间隔8小时左右; 16、认真登记母猪生产卡、配种记录。