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养猪疾病咨询:猪分子标记选择之毛样品的采集和DNA提取是怎样的?
阶段饲养 更新:2017/8/29 字体:
猪分子标记选择之毛样品的采集和DNA提取是怎样的?
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采集猪毛(带毛囊)30根左 右,装入盛有0. 85%灭菌生理盐水的离心管(1. 5毫升)中,冰冻后 带回实验室。如暂时不用,可保存于一 70T超低温冰箱中备用。将猪毛用灭菌双蒸水洗净,剪下毛囊放入盛有200微升TE 溶液的1.5毫升离心管中,然后加入10%十二烷基磺酸钠10微 升、蛋白酶K(20毫克/毫升)5微升,混勻,60C水浴30分钟,37℃ 水浴12?24小时后,用等体积苯酿-氯仿混合液抽提2次,最后用氯仿抽提1次,获得的DNA样品置于一20℃条件下保存备用。
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