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鸡的饲养方法:鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒活疫苗的性状检验作用
鸡病防治 更新:2018/2/7 字体:

鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒活疫苗的性状检验作用用途用法用量等相关知识

鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒活疫苗

JiMalikeshibingHuojiPaozhenbingduHuoyimiao

Marek’sDiseaseVaccine(HVT),Living

本品系用火鸡疱疹病毒Fc-126株,接种于鸡胚成纤维细胞培养,收获感染细胞,加入适宜稳定剂,经裂解、冷冻真空干燥制成。用于预防鸡马立克氏病(MD)。

本品为乳白色海绵状疏松团块,易与瓶壁脱离,加稀释液后迅速溶解。

依法检验(附录169页),应无菌生长。

依法检验(附录172页),应无支原体生长。

依法检验(附录173页第二项),应符合规定。

将含100~200PFU的疫苗用抗火鸡疱疹病毒特异性血清等量混合,18~22℃中和30分钟后,接种单层细胞上培养测定蚀斑,与接种病毒对照组比,蚀斑减少率应不低于95%。

下列方法任选其一。

(1)用l~3日龄易感成SPF雏鸡20羽,其中10羽肌肉注射疫苗0.2ml(含10个使用剂量),观察14日,对照组至少存活8只,免疫组非特异死亡数不得超过对照组,判合格。

(2)用10日龄易感成SPF鸡胚10只,每胚尿囊腔接种疫苗0.1ml(含10个使用剂量),接种后24~4B小时内鸡胚非特异死亡不超过20%,死亡鸡胚尿囊液对鸡红细胞凝集试验应为阴性,120小时,收集活胚尿囊液混合,对鸡红细胞凝集试验应为阴性。

每批疫苗抽样3瓶,分别用SPG稀释,取适当稀释度,每个稀释度接种3个已长成良好单层细胞的30ml容量瓶,每瓶加入0.2ml,在37~38℃吸附60分钟,加入含2%牛血清199营养液,继续培养24小时,弃去营养液,覆盖含5%牛血清的E-MEM或199营养琼脂(糖),每瓶加3ml,待凝固后,将瓶倒置,继续培养5~7日,进行蚀斑计数。蚀斑应典型,清晰,形态不规则,边缘不整齐,直径0.5~l.5mm,呈乳白色,与同时设立的参照品蚀斑一致。计数时,一般选蚀斑数在30~150个之间的细胞瓶进行计数,用肉眼以蜡笔或记号笔在瓶底面点

数,求出同一稀释度3瓶中平均蚀斑数,计算出每瓶疫苗所含蚀斑数。以3瓶疫苗各稀释滴度中的最低平均数核定该批疫苗每羽份中所含的蚀斑数,每羽份应不低于200OPFU。

依法检验(附录175页),应符合兽用生物制品通则的规定。

依法检验(附录181页),应符合兽用生物制品通则的规定。

用于预防鸡马立克氏玻

按瓶签或说明书稀释疫苗,每羽肌肉或皮下注射0.2ml(至少合2000PFU)。

(1)已发生过马立克氏病的鸡场,雏鸡应在出壳后立即进行项防接种。

(2)疫苗应随配随用,用专用稀释液稀释。稀释后放入盛有冰块的容器中,必须在l小时内用完。

(1)200羽份/瓶(2)500羽份/瓶(3)1000羽份/瓶(4)1500羽份/瓶(5)2000羽份/瓶

-15℃以下保存,有效期为1年6个月。

附注

1.SPGA配制

蔗糖76.62gL-谷氨酸单钠0.83g

磷酸二氢钾0.52g牛血清白蛋白10g

磷酸氢二钾(含3个结晶水)1.64g

(或磷酸氢二钾1.25g

补灭菌无离子水或蒸馏水至1000ml,滤过除菌,冷冻保存备用。

2.SPG配制同上,但不加牛血清白蛋白。

3.SPG的检验

(www.med126.com/shouyi/yang/wenda/1)物理性状为无色或微黄色、透明、不含杂质和沉淀的液体。

(2)无菌检验依法按附录169页进行,应无菌生长。

(3)pH值6.7±0.1

(4)复原疫苗后的稳定性测定用SPG将疫苗作适当稀释,取稀释后当时和20℃±2℃静止l小时后的疫苗接种细胞单层,进行蚀斑计数。稀释后20℃±2℃放1小时,疫苗滴度损失不应超过40%,为合格。

用同批号试剂配制多批稀释液,只需检验第一批稀释液,当更换任何试剂的批号时,则重新抽样进行稀释液对疫苗病毒的稳定性试验。

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