猪病常用的血清学诊断方法中斑点酶联免疫吸附试验如何操作?
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第一,硝酸纤维滤膜(NCM)的处理:在滤膜上划 6毫米X6毫米的方格,在方格中央用蘸水笔尖的圆尾末端压 成圆形痕迹。置于蒸馏水中浸泡10分钟,取出后晾干备用。第二,点样:取1微升待检液在硝酸纤维滤膜圆圈内点 样,同时设立阳性与阴性对照,自然干燥或置37°C温箱中干 燥。第三,封闭:将硝酸纤维滤膜置于封闭液中,37°C 30分 钟,用洗涤液洗涤1次,约3分钟。第四,加猪阳性血清,将硝酸纤维滤膜置于猪阳性血清 中,37°C作用1小时,取出用洗涤液洗涤3次,每次3分钟。第五,加酶标
兔抗猪免疫球蛋白G,37°C作用1小时,然 后洗涤3?4次,每次3分钟。