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执业中药师 色谱法的应用
来源:本站原创 更新:2011/4/20 字体:
1、分配柱色谱:载体主要有硅胶、硅藻土及纤维素粉等。
  分离水溶性或极性较大的成分如生物碱、苷类、糖类、有机酸等化合物时,固定相多采用强极性溶剂,如水、缓冲溶液 等,流动相则用氯仿、乙酸乙酯、丁醇等弱极性有机溶剂,称之为正相色谱:
  分离脂溶性化合物,如高级脂肪医学 全在.线提供www.med126.com酸、油脂、游离甾体等时,固定相可用石蜡油,流动相 用水或甲醇等强极性溶剂,称为反相分配色谱。
  2、吸附色谱法应用
  (1)硅胶、氧化铝吸附柱色谱过程中,吸附剂的用量一般为样品量的30-60倍。样品极性较小、难以分离者,吸附剂用量可适当提高至样品量的100-200倍。
  (2)硅胶、氧化铝吸附柱色谱,应尽可能选用极性小的溶剂装柱和溶解样品,以利于样品在吸附剂柱上形成狭窄的原始谱带。
  (3)洗脱所用溶剂的极性宜逐步增加。
  (4)为避免发生化学吸附,酸性物质宜用硅胶,碱性物质则宜用氧化铝进行分离。
  3、聚酰胺吸附色谱法
  聚酰胺(polyamide)吸附属于氢键吸附,特别适合分离酚类、醌类、黄酮类化合物。
  (1)聚酰胺的性质及吸附原理
  酰胺羰基与酚类、黄酮类化合物的酚羟基,或酰胺键上的游离氨基与醌类、脂肪羧酸上的羰基形成氢键缔合而产生吸附。创吸附强弱则取决于各种化合物与之形成氢键缔合的能力。
  ① 形成氢键的基团数目越多,吸附能力越强。
  ② 成键位置对吸附力也有影响。易形成分于内氢键者,其在聚酰胺上的吸附相对减弱。
  ③ 分子中芳香化程度高者,则吸附性增强;反之,则减弱。
  一般情况下,各种溶剂在聚酸胺柱上的洗脱能力由弱至强,可大致排列成下列顺序;水→甲醇→丙酮→氢氧化钠水溶液→甲酰胺→二甲基甲酰胺→尿素水溶液
  (2)聚酰胺色谱的应用
  聚酰胺对一般酚类、黄酮类化合物的吸附是可逆的(鞣质例外),特别适用于该类化合物的制备分离,可用于植物粗提物的脱鞣质。此外,对生物碱、萜类、甾体、糖类、医学全在线www.med126.com氨基酸等极性与非极性化合物也有着广泛的用途。
  4、大孔吸附树脂
  (1)大孔吸附树脂的吸附原理:大孔吸附树脂是吸附性和分子筛性原理相结合的分子材料。吸附性是由于范德华引力或产生氢键的结果,分子筛性是由于其本身多孔性结构所决定的。
  (2)影响吸附的因素:大孔吸附树脂本身的性质、溶剂的性质和化合物的性质是影响吸附的3个重要因素。
  (3)大孔吸附树脂的应用:苷与糖类的分离,生物碱的精制,多糖、黄酮、三萜类化合物的分离。
  (4)洗脱液的选择:洗脱液可使用甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等。
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