6.自身抗体的联合检测方法在血清中存在的多种自身抗体,可用多种组织抗原组合制作成复合抗原检测。抗原组成可包括以下组织:
(1)肝脏:①检出抗核抗体;②抗肝细胞膜抗体;③抗胆管上皮细胞抗体;④抗核仁抗体等。可用大鼠或小鼠肝组织。
(2)胃:①检出胃壁细胞抗体;②平滑肌抗体;③抗核抗体。必须用小鼠胃组织。
(3)甲状腺组织:①检出甲状腺球蛋白抗体;②检出甲状腺微粒体抗体;③检出抗第二胶质抗体;④检出抗核抗体。可用人、猴、兔等甲状腺组织。
(4)肾:①检出线粒体抗体(远端肾小管);②抗核抗体;③抗基底膜抗体。
(5)心肌:抗心肌抗体。
(6)横纹肌:①肌无力全并胸腺瘤A带(暗带)抗体;②肌无力I带(明带)抗体和H带抗体;③肌无力白纤维骨骼肌抗体;④肌无力骨骼肌红纤维抗体。
(7)人结肠;抗结肠粘膜抗体。
(8)胰腺:胰腺细胞抗体。
(9)肾上腺:肾上腺皮质细胞抗体。
(10)神经组织:根据需要将多种抗原组合。
按间接法进行检测,如发现某种自身抗体,再作滴度测定,这是一种联合筛选试验,十分简便,已作常规应用。
7.微波增敏快速自身抗体检测方法近年微波技术用于免疫组织化学检测自身抗体方法,取得了良好的效果。微波是一种高频电磁波,经微波辐射引起离子极化,旋转,分子间磨擦,使能量发生转换,产生热能而加快了抗原抗体反应的速度,适用于临床快速检验和诊断。
(1)抗原切片(同免疫荧光法)。
(2)微波增敏快速方法
①抗原切片先用PBS洗,吹干,放入湿盒中(用有机玻璃制作,内放少许蒸馏水)。
②滴加1:5稀释的待检血清,将湿盒移入微波炉内转盘上,调中档微波强度辐射1min,放置5min。
③PBS洗2次,各1min。
④荧光抗体反应1min(同步骤2),放5min 。
⑤PBS洗2次,各1min。
⑥缓冲甘油封片。荧光显微镜检测。
(3)结果:阳性为黄绿色荧光,阳性为红色。微波炉型号不同,应经预实验选定强度和时间。