（三)乙型肝炎肝细胞内病毒抗原的定位及分布
近年来，对乙型肝炎病毒（HBV)分子生物学研究表明，HBV基因组有四个开放读框（Open reading frame, ORF)，其中S基因区能编码HBV外壳的结构蛋白，即小S蛋白（主蛋白，HBsAg)，中等S蛋白（前S2抗原)和大S蛋白（前S1抗原)，它们都具有较高的免疫原性。P区编码具有反转录酶活性的病毒DNA多聚酶。X区编码145至154个氨基酸的多肽，编码蛋白为HBxAg。C区编码HBV的核心部分，即HBcAg 和HBeAg。目前通过免疫组化及免疫电镜等技术均可观察到HBV各种抗原在肝细胞定位及分布状态。
1．HBsAg pre –S1,pre-S2在肝细胞内的分布HBsAg ，前S1和前S2抗原在乙型肝炎，特别是慢性活动性肝炎的肝细胞内检出率为52～65%。HBsAg ，前S1和前S2抗原阳性经常出现于同一部位，甚至同一细胞内。前S1阳性反应比HBsAg和前S2强。有的病例三者并非同时出现，并非在同一位置。少数情况下，HBsAg 阳性，而前S1和前S2阴性，反之，HBsAg 阴性，而前S1和S2阳性；绝大多数情况下前S1和前S2并存在同一部位或同一细胞之内，少数情况下，HBsAg ，前S1阳性而前S2弱阳性或阴性。HBsAg、前S1和前S2抗原主要位于乙肝的肝细胞浆内，部分位于胞膜上，少数位于胞核内。HBsAg ，前S1和前S2抗原阳性物质在肝细胞内的分布大致有三种形态：①包涵体型：阳性物质聚集成团块状，轮廓清楚，呈圆形或卵圆形，位于核的一侧，或者只占据胞浆的小部分，或占据胞浆的大部分，将核推向一侧，此型最为多见；②全胞浆型或弥漫型：阳性物质均匀分布于肝细胞的胞浆内，核往往为阴性位于中央，此型亦较常见；③胞膜型或周边型：阳性物质沿着胞膜或胞膜内侧分布，有人把胞膜型再分为胞膜抗原I型和II型，前者主要表现为S抗原聚集在肝窦侧的肝细胞膜上，呈线条状排列；后者主要累及整个肝细胞膜，呈颗粒状或串珠排列。上述S抗原在肝细胞内分布的三种类型往往是两者或三者联合出现，只是以某一种为主而已，单独存在者少见。S抗原阳性细胞的分布有三种类型：1)散在型，在切片中只见少数散在的阳性细胞，此型多见于慢性迁延性肝炎或静止期肝硬变组织内；2)局灶型，阳性细胞呈簇分布于切片的某一区域，此型多见于急性轻型肝炎或慢性活动性肝炎的组织内；3)弥漫型，多数阳性细胞弥漫分布于切片内，此型多见于慢性活动性肝炎，急性重型肝炎或肝硬变的整个结节 内。不同病例S抗原反应强度及阳性细胞检出率是不同的，就是同一病例不同部位也不尽相同。S抗原阳性物质反应的强弱取决于S抗原的含量。
2．HBcAg 和HBeAg在肝细胞内分布HBcAg多见于乙型肝炎、肝硬变的肝细胞内，特别是肾脏移植病人，有内HBcAg检出率特别高。一般来说，在慢性肝炎HBcAg的检出率在10%～30%不等，其检出率明显低于HBsAg。这可能是由于HBcAg和抗-HBc在核内形成免疫复合物，HBcAg被封闭之故。HBcAg多位于肝细胞的胞核内，少数位于胞浆内及胞膜上。HBcAg阳性物质位于核内常呈细颗粒状均匀分布，少数为斑点状或网状；而在胞浆内则为细颗粒状或絮状；在胞膜上则为均匀细颗粒状。经常出现的是以核型、浆型和膜型同时存在于一个肝细胞内，亦可单独存在。HBcAg阳性肝细胞的分布和HBsAg相似，亦分散在型、局灶型和弥漫型。局灶型经常见于慢性活动性肝炎；弥漫型经常见于肾移植的肝；散在型经常见于急性肝炎或迁延性肝炎。HBeAg阳性物质在肝细胞内的分布状态与HBcAg相似。HBeAg 和HBcAg经常位于同一细胞核内，用罗达明标记双染色证明HBcAg和HBeAg之间有密切关系。HBeAg阳性主要见于HBsAg阳性的慢性活动性肝炎的肝细胞内。
3．HBxAg在肝细胞内分布HBxAg经常见于慢性肝炎的肝细胞内，其检出率为65%左右，比HBcAg和HBsAg高。特别在慢性活动性肝炎检出率更高，约73%；而慢性迁延性肝炎则为43%左右。HBxAg阳性物质为均匀细颗粒状，主要位于肝细胞的胞浆内，少数位于胞核内及胞膜上。不同病例HBxAg阳性物质的分布及阳性反应强度不同，就是同一病例不同部位其结果亦不尽相同。HBxAg阳性肝细胞的分布状态和HBsAg相似，亦呈散在型，局灶型和弥漫型。在慢性活动性肝炎以局灶型多见，其次为弥漫型。有些病例，HBxAg阳性细胞围绕小血管分布，有的则沿着纤维隔分布。HBxAg阳性物质亦见于少数肝内胆管上皮内及kupffer细胞内。
4．IgG(抗-HBc)在肝细胞内分布用免疫荧光及免疫酶技术证实在肝炎组织中存在Igg ，这种IgG 可能就是抗-HBc，该抗体经常和HBcAg以复合物的形式存在于肝细胞核内，少数也见于胞浆内及胞膜上。Rey（1979)还证明这些IgG只见于含有HBcAg 的肝细胞核内。IgG(抗-HBc)阳性物质的分布及其阳性细胞的分布同HBcAg。
