实验十一  霍乱弧菌

霍乱弧菌(V.cholerae)可分为古典生物型和ElTor生物型；根据菌体抗原(O抗原)又可分为155个血清群，其中O₁血清群和O₁₃₉血清群是霍乱的病原菌，能引起霍乱的发病和流行。

形态与培养特性

【材料与方法】

1．霍乱弧菌革兰染色片。

2．霍乱弧菌(水弧菌代)碱性蛋白胨水培养物。

3．霍乱弧菌于TCBS培养基上的分离培养物。

【结果】

1．霍乱弧菌为革兰阴性菌，菌体弯曲呈弧形或逗点状，平行排列似鱼群状。

2．以悬滴法观察动力，细菌运动活泼，呈穿梭样或流星状。

3．霍乱弧菌在TCBS培养基上可形成较大、黄色的菌落。

附录：

（一)荧光菌球试验

【原理】

荧光菌球试验是一种新型的免疫荧光快速诊断技术。其原理是在细菌培养液中加一定量荧光抗体，然后接种标本，若粪便中有相应的病原菌时，抗体即与之结合发生凝集，凝集后细菌并不死亡，在适宜温度下仍能继续繁殖而集合成团，在荧光显微镜下呈现一团绒球样荧光，故称荧光菌球。

【材料与方法】

1．将霍乱弧菌接种于含有一定量荧光抗体的碱性蛋白胨水中，37℃增菌6～8h。

2．挑取1环上述培养物于清洁玻片上，放上盖玻片，在荧光显微镜下观察。

【结果】

荧光球大而发亮呈圆球状，结构较疏松，周围近似卷www.med126.com/pharm/发状。随孵育时间增长，菌球结构致密，周围较圆，整齐，菌球周围有刺毛，有的如银丝般缠绕。孵育时间短时，菌球往往呈多形性。

（二)制动试验

【原理】

霍乱弧菌在液体培养基中可见流星似的运动，若在培养液内加人霍乱免疫血清，则霍乱弧菌凝集，运动停止，称为制动试验。可用于霍乱弧菌的快速早期诊断。

【材料与方法】

1．取病人水样便6h蛋白胨培养液0.25ml，加适量稀释的霍乱免疫血清0.25ml，混匀。

2．取上述样品0.25ml，加0.25ml生理盐水混匀，作为对照。

3．置37℃5min，观察结果。

【结果】

凡凝成小块，动力消失者为阳性，反之为阴性。